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产品名称：Cy5-Vimentin， 花菁素Cy5标记波形蛋白

一、合成方法

1. 合成路线

步骤：

波形蛋白的预处理：

通过重组表达或细胞裂解液提取波形蛋白，确保其天然构象。

Cy5染料的活化：

将Cy5-NH₂与琥珀酰亚胺酯（NHS ester）反应，生成活性酯。

标记反应：

活性酯化的Cy5与波形蛋白的氨基反应，形成酰胺键。

关键点：

反应需在低温（4℃）和中性pH（pH 7.4）下进行，避免波形蛋白变性。

使用过量Cy5染料（摩尔比10:1）提高标记效率。

2. 纯化与表征

纯化：

通过凝胶过滤（如Sephadex G-25）去除未反应的Cy5和副产物。

表征：

SDS-PAGE：检测波形蛋白的分子量是否符合预期。

荧光光谱：验证Cy5的激发和发射波长是否符合标准。

质谱（MS）：确认Cy5与波形蛋白的连接。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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