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产品名称:FITC-D-Lys,异硫氰酸荧光素标记赖氨酸细胞成像
1. 概念与结构
FITC(异硫氰酸荧光素):
化学名称:5-异硫氰酸荧光素。
结构:具有荧光特性的有机化合物,含有一个异硫氰酸基(-N=C=S),可与蛋白质或多肽的氨基(-NH₂)反应。
特性:在495 nm波长激发下发出绿色荧光(发射波长520 nm),常用于生物标记和成像。
D-Lys(D-赖氨酸):
化学名称:D-2,6-二氨基己酸。
结构:D型氨基酸,含有一个α-氨基和一个ε-氨基。
功能:作为蛋白质和多肽的组成部分,参与多种生物过程。
FITC-D-Lys:
结构:FITC通过异硫氰酸基与D-Lys的氨基反应,形成稳定的硫脲键。
特性:保留了D-Lys的生物活性和FITC的荧光特性,可用于细胞成像。
2. 合成方法
直接标记法:
步骤:
活化FITC:FITC以粉末形式溶解于DMSO(二甲基亚砜)中,形成FITC溶液。
反应:将D-Lys溶解于缓冲液(如PBS)中,pH调整至8.5-9.0,加入FITC溶液,室温避光反应2-4小时。
纯化:通过透析或色谱技术(如凝胶过滤色谱)纯化产物,去除未反应的FITC和副产物。
鉴定:通过紫外-可见光谱和荧光光谱确认标记产物的形成。
关键点:
pH控制:反应pH需控制在8.5-9.0,以确保FITC的异硫氰酸基与D-Lys的氨基有效反应。
避光操作:FITC对光敏感,整个反应过程需避光进行。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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