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产品名称：藻红蛋白标记链霉亲和素,PE-Streptavidin

1. 定义与结构

定义：PE-Streptavidin是一种将藻红蛋白（Phycoerythrin, PE）与链霉亲和素（Streptavidin）共价结合的荧光标记试剂。

结构：

核心成分：

藻红蛋白（PE）：从红藻中提取的荧光蛋白，激发波长488-565 nm，发射波长575-590 nm（橙红色荧光）。

链霉亲和素（Streptavidin）：四聚体蛋白，每个亚基可特异性结合一个生物素（Biotin）。

连接方式：通过化学交联剂（如SMCC、Sulfo-SMCC）将PE的氨基与链霉亲和素的羧基偶联。

2. 制备方法

步骤 方法 关键点

PE活化 NHS酯化或马来酰亚胺活化 控制活化度（通常1-2个PE/链霉亲和素），避免过度交联导致荧光淬灭。

交联反应 混合活化PE与链霉亲和素，室温孵育 优化pH（7.2-8.0）和反应时间（1-2 h），确保高偶联效率（>90%）。

纯化 凝胶过滤色谱（GFC）或离子交换色谱 去除未反应的PE和交联剂，保留高荧光活性的PE-链霉亲和素。

质量检测 SDS-PAGE、荧光光谱、生物素结合力 确认分子量（约60 kDa）、荧光强度（>10⁶ M⁻¹cm⁻¹）和生物素结合常数（Kd≈10⁻¹⁴ M）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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