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Cy3/5/7标记PE藻红蛋白 ,Cyanine5-PE/CY5-PE
发布时间:2025-04-08     作者:wyh   分享到:

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产品名称:Cy3/5/7标记PE藻红蛋白 ,Cyanine5-PE/CY5-PE

一、PE藻红蛋白(Phycoerythrin, PE)简介

来源与结构

PE是从红藻(如多管藻)中提取的荧光蛋白,分子量约240 kDa,由α、β、γ亚基组成,天然状态下以(αβ)₆γ形式存在。

光学特性

激发/发射波长:天然PE(545/575 nm),适用于流式细胞术等荧光检测。

荧光量子产率:高(>0.8),但光稳定性较差。

二、Cy3/Cy5/Cy7染料特性

| 染料 | 激发波长 (nm) | 发射波长 (nm) | 适用场景 |

||-|-|--|

| Cy3 | 550 | 570 | 短波长检测(如流式细胞术) |

| Cy5 | 649 | 670 | 长波长检测(如近红外成像) |

| Cy7 | 743 | 767 | 深组织穿透(如活体成像) |

三、Cy染料标记PE的原理与方法

标记原理

化学偶联:利用PE表面的氨基(-NH₂)与Cy染料的活性基团(如NHS酯)反应,形成稳定的酰胺键。

标记位点:主要标记PE的α或β亚基的赖氨酸残基。

标记步骤

缓冲液准备:0.1 M 碳酸盐缓冲液(pH 8.5)。

染料与蛋白比例:Cy5-NHS酯 : PE = 5:1(摩尔比)。

反应条件:室温避光反应2小时,4℃过夜。

纯化:通过凝胶过滤或透析去除未反应染料。

标记效率评估

光谱分析:

PE吸收峰:545 nm(标记后保留)。

Cy5吸收峰:650 nm(新增)。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

Cy3/5/7标记PE藻红蛋白 ,Cyanine5-PE/CY5-PE

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