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产品名称：FITC-Biotin，异硫氰酸荧光素标记生物素

一、结构与功能

核心组成

FITC（异硫氰酸荧光素）

绿色荧光染料（激发/发射：495/519 nm），常用于流式细胞术、免疫荧光染色。

Biotin（生物素）

小分子维生素（分子量244 Da），与链霉亲和素（Streptavidin）结合力极强（Kd ≈ 10⁻¹⁴ M）。

结构优势

双功能化：FITC提供荧光标记，Biotin实现特异性结合。

应用场景：

生物分子标记：抗体、蛋白质、核酸的荧光标记与亲和纯化。

多模态检测：结合荧光显微镜与链霉亲和素信号放大系统。

二、合成方法

直接标记法

反应条件：

生物素分子中的氨基（-NH₂）与FITC的异硫氰酸酯基（-N=C=S）在pH 8.5-9.5的碳酸盐缓冲液中反应。

温度：室温，时间：2-4小时。

纯化：

透析或凝胶过滤去除未反应FITC。

高效液相色谱（HPLC）验证纯度（>95%）。

关键控制点

标记比例：

FITC与Biotin的摩尔比通常为1:1至1:5，避免过量FITC导致荧光淬灭。

pH值：

pH过高（>10）会导致FITC水解，pH过低（<8）影响反应速率。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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