fitc荧光染料激发发射波长是多少？Fitc的使用方法介绍！

FITC（Fluorescein Isothiocyanate，异硫氰酸荧光素）是一种经典且广泛使用的绿色荧光染料，在免疫学、细胞生物学和生物化学实验中被用来标记抗体、蛋白质、多肽、寡核苷酸等，用于荧光显微镜、流式细胞术（FACS）、ELISA和各种生物成像。

基本信息

中文名称：异硫氰酸荧光素

英文缩写：FITC

激发波长（Ex）：约 495 nm

发射波长（Em）：约 519–525 nm

荧光颜色：绿色

分子量：约 389.4 Da（FITC-NH2）；依赖于修饰形式

溶解性：可溶于DMSO、DMF、少量有机溶剂；低水溶性

化学结构与偶联机制

功能基团：异硫氰酸基（–N=C=S）

作用机制：可与生物分子的伯胺（–NH₂）发生共价反应，常用于抗体、蛋白质或多肽的标记。

应用领域

抗体/蛋白标记

FITC常用于免疫荧光实验（IF）或流式细胞术（FACS）中标记一抗或二抗，方便追踪目标分子的表达与分布。

流式细胞术

标记细胞表面或胞内抗原，用于细胞分型、凋亡分析、活性评估等。

荧光显微成像

可检测细胞或组织中抗原的定位和表达，通过FITC标记抗体实现绿色信号显示。

多重染色

与其他荧光染料（如TRITC、DAPI、Cy5等）组合用于多通道成像实验。

DNA/RNA探针标记

可与寡核苷酸连接，用于FISH、杂交探针和qPCR探针开发。

✅ 优点

应用广泛，具有高度成熟的使用体系

成本低，易于获取

与多数检测系统兼容（如显微镜、流式、酶标仪等）

缺点和注意事项

光稳定性差：易被光照分解，长时间曝光会发生荧光淬灭，需避光操作

pH敏感：荧光强度受pH影响较大（在 pH 6.5~8.0 范围内较稳定）

易水解：异硫氰酸基团对水敏感，应现配现用

荧光寿命短：信号持续性较差，不适合长时程追踪成像

常见FITC衍生物

与其他绿色荧光染料比较

抗体FITC标记操作简要流程（NHS酯法）

溶解FITC-NHS于DMSO（避免水）

将蛋白质溶于碱性缓冲液（如0.1 M NaHCO₃，pH 8.5）

按比例加入FITC-NHS溶液（一般摩尔比为5~20:1）

避光孵育1小时

使用透析或凝胶过滤柱去除游离FITC

测定标记效率（通过光密度比OD495/OD280）

总结

FITC 是一种经典、高效且经济的荧光染料，适用于多种生物标记实验。它的绿色荧光信号清晰、易于检测，但在光照和pH条件下需控制，适合短期观察实验和常规标记。

我们专注于提供多种荧光染料及其衍生试剂，涵盖从可见光区到近红外区的广泛波段，包括FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、Rhodamine、Alexa Fluor、Sulfo类染料等，适用于生物标记、分子探针、成像追踪、细胞分析、药物递送等多个研究领域。我们的荧光染料具备光稳定性、良好的水溶性，部分产品还配有活性基团（如NHS、Maleimide、Hydrazide、Azide等），便于与蛋白、多糖、脂质或聚合物共轭。无论是基础科研还是应用开发，我们均可提供定制服务与技术支持

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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