DSPE-PEG-Acid，即DSPE-PEG-COOH MW2000的实验使用方法

DSPE-PEG-Acid（即DSPE-PEG-COOH, 分子量2000）的实验使用方法详解

DSPE-PEG-Acid，也称为DSPE-PEG-COOH，是一种功能化的磷脂-聚乙二醇衍生物，具有良好的两亲性结构和可修饰性，在生物医学、药物递送、靶向纳米载体、脂质体修饰以及表面功能化等研究中扮演关键角色。尤其是其羧基（-COOH）末端可用于偶联各种功能分子，如抗体、寡核苷酸、肽类或小分子药物，进一步扩展其在靶向、成像和治疗中的应用。以下将围绕DSPE-PEG2000-COOH在实验中的使用方法、溶解性、脂质体制备、耦合反应和储存等方面进行系统介绍。

一、基础信息与物理化学性质

化学名称：1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[聚(乙二醇)-羧基]（分子量2000）

结构组成：硬脂酰磷脂基团（疏水部分）+ PEG2000（亲水链）+ 羧基（可反应基团）

外观：白色或类白色固体粉末

溶解性：

易溶于氯仿、DMSO、甲醇、乙醇等有机溶剂；

在水中或PBS中形成胶束或插入双层结构，需加热或超声促进溶解；

储存条件：低温避光干燥保存（–20°C），避免反复冻融和水汽吸附。

二、实验使用方法概述

（1）脂质体/胶束制备中的用法

DSPE-PEG-COOH在脂质体或胶束中的使用主要目的包括：

提供稳定的PEG化保护层，延长血液循环时间；

羧基末端便于偶联靶向分子，实现功能化；

改善颗粒稳定性和分散性。

常用制备方法如下：

A. 薄膜水化法（用于制备DSPE-PEG修饰的脂质体）

溶解脂质组分：将DSPE-PEG-COOH与主脂质（如HSPC、DSPC、Chol）按照摩尔比（一般为主脂质:Chol:DSPE-PEG = 65:30:5）溶于氯仿或氯仿/甲醇混合液中；

旋转蒸发制膜：在旋转蒸发器中蒸去溶剂，形成均匀脂质膜；

水化：加入预热至60℃的缓冲液（PBS、HBS等），在旋转条件下水化膜30–60 min；

超声或挤出处理：使用探头超声或膜挤出法使脂质体粒径均一；

后处理：可进行透析或离心去除未包封物。

B. 自组装法（制备DSPE-PEG胶束）

称取DSPE-PEG-COOH（5–10 mg）溶于氯仿（1–2 mL）；

蒸干溶剂制膜，或直接将溶液缓慢滴加至水中（70°C）；

在70°C下加热搅拌，形成胶束结构；

通过超滤或离心去除大颗粒，获得稳定分散的胶束。

（2）活性分子偶联实验（羧基活化）

DSPE-PEG-COOH的羧基可通过EDC/NHS或EDC/sulfo-NHS体系活化，进一步与胺基官能团偶联形成稳定的酰胺键。此反应适用于偶联蛋白质、抗体、药物或荧光分子。

典型偶联流程如下：

活化步骤：

将DSPE-PEG-COOH溶于MES缓冲液（pH ~5.5–6.0）或DMSO中；

添加EDC与NHS（摩尔比通常为1:2:2），室温反应15–30分钟；

活化后产物为NHS酯形式，具有良好的反应活性。

偶联反应：

将目标胺类分子（如抗体、药物、氨基修饰荧光探针）溶于PBS中；

缓慢加入活化后的DSPE-PEG-NHS溶液，pH调至7.4；

反应时间为2–4小时或过夜（4°C）；

产物可通过透析、凝胶过滤或离心等方式纯化。

注意事项：

羧基活化体系应新鲜配置，避免水解；

大分子（如抗体）在偶联中需避免变性，pH和缓冲体系应兼容蛋白活性。

三、实际应用案例

靶向脂质体制备：将DSPE-PEG2000-COOH偶联RGD肽，用于肿瘤血管靶向纳米载体构建；

表面修饰：将DSPE-PEG-COOH插入脂质单层/双层膜中，实现纳米颗粒表面羧基修饰；

荧光标记纳米粒：通过COOH基团连接FITC-PEG-NH₂或Cy5.5等探针，实现多模态成像功能；

药物包封胶束系统：DSPE-PEG胶束用于载药（如紫杉醇、顺铂前药）制备亲水外壳保护结构，提升体内稳定性。

四、注意事项与常见问题

溶解困难：在水系中直接溶解DSPE-PEG-COOH可能较困难，建议先溶于有机溶剂或使用温水+超声辅助；

反应效率不高：偶联反应中应优化pH值、活化时间和摩尔比，确保羧基活化效率；

分散性问题：制得的脂质体/胶束如出现聚集，应优化挤出孔径、超声功率或加入辅助乳化剂。

五、总结

DSPE-PEG2000-COOH（DSPE-PEG-Acid）因其良好的两亲性、功能化末端和生物相容性，在药物递送与纳米医学领域具有广泛用途。通过控制其与其他磷脂或功能分子的配比，可灵活构建多功能脂质体、靶向胶束或表面功能化平台。掌握其溶解特性、反应活化机制与脂质体包覆方法，有助于实现高效稳定的纳米药物载体开发。

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厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

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