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产品名称:炔基PEG马来酰亚胺;MAL-PEG1000-Alkyne
反应活性与修饰策略
MAL端偶联反应:
与巯基(-SH)偶联:
迈克尔加成反应:在PBS(pH 7.4)中,MAL-PEG₁₀₀₀-Alkyne与含巯基分子(如半胱氨酸修饰的多肽、马来酰亚胺活化的抗体)反应,生成硫醚键(-S-),同时释放质子(H⁺),可通过pH监测反应进程。
条件优化:MAL-PEG₁₀₀₀-Alkyne:巯基=1:1.2(摩尔比),室温反应30分钟,产率>95%(通过HPLC检测巯基消耗量确认)。
与硫醇化纳米粒偶联:
在金纳米粒表面修饰巯基聚乙二醇(HS-PEG-COOH),再与MAL-PEG₁₀₀₀-Alkyne反应,生成金纳米粒-PEG₁₀₀₀-Alkyne(可用于后续CuAAC标记)。
炔基端偶联反应:
CuAAC反应(铜催化点击化学):
在PBS(pH 7.4)中,加入CuSO₄(50 μM)、抗坏血酸钠(1 mM)和叠氮化物(如Azido-Cy5),与MAL-PEG₁₀₀₀-Alkyne反应生成三唑环(-C≡C-N₃→-C≡N-C-),产率>90%(通过荧光光谱监测Cy5信号确认)。
条件优化:MAL-PEG₁₀₀₀-Alkyne:叠氮化物=1:1.5(摩尔比),37℃反应1小时,铜催化剂需避光保存(防止氧化)。
SPAAC反应(无铜点击化学):
在PBS(pH 7.4)中,与DBCO-PEG₅₀₀-COOH反应,生成三唑环(-C≡C-DBCO→-C≡N-C-),产率>85%(通过GPC检测分子量变化确认)。
优势:无需铜催化剂,避免细胞毒性,适用于活细胞标记。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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