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产品名称:磷脂PEG荧光素;DSPE-PEG-FITC
反应活性与修饰策略
DSPE-PEG-NH₂前体合成:
DSPE-PEG-NHS与NH₂-FITC偶联:
在pH 8.0的PBS中,DSPE-PEG-NHS(MW=2000 Da)与NH₂-FITC(摩尔比1:1.2)室温反应2小时,生成DSPE-PEG-FITC(产率>90%,通过HPLC监测NHS峰消失确认)。
关键参数:NHS酯活性受pH影响(pH 7-8时反应速率常数k≈10⁻² M⁻¹s⁻¹,pH 9时k≈10⁻¹ M⁻¹s⁻¹,但需避免过高pH导致FITC水解)。
脂质体标记实验:
薄膜水化法:
将DSPE-PEG-FITC(摩尔占比1-5%)与HSPC、胆固醇混合,溶于氯仿,旋转蒸发形成薄膜。
加入PBS水化,超声形成脂质体(粒径约100 nm,PDI<0.2)。
通过荧光光谱(λex=495 nm,λem=520 nm)检测标记效率(>95%,与游离FITC对比)。
后插入法:
将DSPE-PEG-FITC溶于甲醇,注入预成型的脂质体溶液(50℃),孵育30分钟,插入效率>80%(通过透析去除游离染料)。
细胞膜标记实验:
HeLa细胞标记:
将DSPE-PEG-FITC(10 μM)与细胞共孵育30分钟(37℃)。
通过共聚焦显微镜观察,荧光信号集中于细胞膜(信噪比>20:1,与游离FITC胞内扩散对比)。
流式细胞术分析,标记效率>90%(与未处理细胞对比)。
生物相容性与体内行为
安全性:
细胞毒性:在HeLa细胞中,DSPE-PEG-FITC(50 μM)处理24小时后,细胞存活率>95%(MTT法),毒性显著低于游离FITC(50 μM下存活率<70%,因FITC疏水性导致胞内聚集)。
免疫原性:在小鼠皮下注射(10 mg/kg剂量),未引发炎症反应(H&E染色显示组织无损伤),适合临床前研究。
体内代谢:
PEG链稳定性:在血浆中37℃孵育24小时,PEG链脱落率<2%(通过GPC检测),显著优于无PEG修饰的脂质体(脱落率>15%)。
脂质体循环时间:标记脂质体在小鼠体内半衰期达8小时(未标记脂质体半衰期<1小时),适用于长循环药物递送。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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