产品基本信息
化学名称:罗丹明RBRhodamine B,-罗丹明RB-β-淀粉样蛋白(1-42)
肽序:RB-DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIGLMVGGVVIA
结构:罗丹明RB(Rhodamine B,RB)通过共价键连接至Aβ(1-42)肽段的N端或内部赖氨酸残基。
分子特性:
Aβ(1-42):全长42个氨基酸,是阿尔茨海默病(AD)中神经毒性最强的Aβ亚型,易形成寡聚体和纤维。
罗丹明RB:橙红色荧光染料,激发波长550 nm,发射波长570-580 nm,光稳定性强,适用于长时间成像。
核心优势与应用场景
1. 荧光标记的独特价值
长波长荧光:
RB的发射波长(570-580 nm)位于可见光红光区,可有效避开生物样品的自发荧光(如NADH的蓝光发射),显著提高信噪比。
类比:如同在嘈杂环境中使用定向麦克风,RB的长波长荧光能更精准地捕捉目标信号。
光稳定性:
在连续光照下,RB的荧光强度衰减缓慢,适合长时间动态监测(如Aβ聚集的实时成像)。
数据支持:研究表明,RB的光漂白半衰期是FITC的3-5倍,更适合需要持续观察的实验。
2. AD病理机制研究
Aβ聚集动力学:
荧光强度变化可反映Aβ从单体到寡聚体、纤维的转变。
结合透射电镜(TEM)验证聚集形态,确保荧光信号与实际聚集状态一致。
实验设计:将RB-Aβ(1-42)与未标记的Aβ(1-42)混合,通过荧光光谱监测聚集过程。
结果分析:
神经毒性评估:
Aβ斑块的动态形成。
药物干预(如抗Aβ抗体)对斑块清除的效果。
荧光信号的细胞内分布(如胞质、突触)。
神经元凋亡率(如TUNEL染色)。
细胞模型:将RB-Aβ(1-42)加入原代神经元培养体系,通过共聚焦显微镜观察:
动物模型:在转基因AD小鼠(如5xFAD)脑内注射RB-Aβ(1-42),通过小动物活体成像系统观察:
3. 药物筛选与开发
高通量筛选(HTS):
RB的长波长荧光可避免化合物自身荧光的干扰。
实验周期短(通常24-48小时),适合大规模筛选。
实验流程:
优势:
将RB-Aβ(1-42)与待测化合物共孵育。
通过荧光光谱或微孔板阅读器测量聚集抑制率。
筛选出IC₅₀值低的化合物进行进一步验证。
药效验证:
在细胞模型中,验证药物是否能减少RB-Aβ(1-42)诱导的神经毒性。
在AD动物模型中,通过脑内注射RB-Aβ(1-42),观察药物对Aβ沉积的抑制作用。
指标:荧光斑块的数量、大小和分布。
体内实验:
体外实验:
4. 细胞与组织成像
跨细胞传递研究:
将RB-Aβ(1-42)加入血脑屏障(BBB)体外模型(如共培养的内皮细胞和星形胶质细胞)。
通过荧光显微镜观察Aβ的跨膜转运过程。
实验设计:
应用:研究Aβ如何从血液进入脑组织,为开发BBB穿透性药物提供依据。
组织切片分析:
实验流程:
将注射RB-Aβ(1-42)的动物脑组织进行冷冻切片。
通过荧光显微镜观察Aβ在特定脑区(如海马、皮层)的沉积模式。
结合免疫组化(如抗Aβ抗体)验证荧光信号的特异性。
技术注意事项
1. 标记效率与纯度
关键点:
确保RB与Aβ(1-42)的共价连接效率高(通常≥90%)。
通过高效液相色谱(HPLC)或质谱(MS)验证未标记Aβ的残留量(应低于5%)。
影响:
低标记效率或高杂质含量可能导致荧光信号弱或实验结果不可靠。
2. 荧光信号稳定性
环境因素:
pH:RB在pH 6.5-7.5范围内荧光强度稳定,但在极端pH(如酸性溶酶体)下可能减弱。
温度:高温(>37°C)可能加速光漂白,需在实验中控制温度。
解决方案:
在细胞实验中,使用含HEPES的缓冲液维持pH稳定。
在活体成像中,缩短曝光时间以减少光漂白。
3. 生物学活性验证
关键实验:
聚集实验:通过硫黄素T(ThT)荧光或圆二色谱(CD)验证RB-Aβ(1-42)的聚集能力是否与未标记Aβ一致。
神经毒性实验:通过MTT法或LDH释放实验确认RB标记未显著改变Aβ的毒性。
总结与展望
罗丹明RB-B-Amyloid (1-42) 作为一种高灵敏度、长波长荧光标记的Aβ工具,在AD研究中具有不可替代的价值。其独特的荧光特性使其能够:
实时、动态监测Aβ的聚集和神经毒性。
高效筛选抗AD药物。
深入解析Aβ在细胞和组织中的行为。
包装形式: 瓶装
规格选择: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存条件: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司是一家专注于靶向药物递送的企业。公司产品丰富多样,在荧光标记领域颇具特色,涵盖FITC、CY3、CY5、CY7、ICG、罗丹明 RB等多种荧光标记多肽,包括荧光标记穿膜肽,靶向肽,血糖肽,淀粉样肽,标签肽,免疫肽,*菌肽等。广泛应用于生物医学研究、细胞成像等多个方向。同时,其业务范围还拓展至纳米材料、PEG 衍生物、生物素标记物等产品,为科研工作者提供多样化选择。
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