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产品名称:六臂PEG羧基,6ARM-PEG-COOH
实验操作指南
1. 羧基活化与偶联反应
经典方法:
EDC/NHS法:
将6ARM-PEG-COOH(1 eq)溶于MES缓冲液(pH 5.5),加入EDC(4 eq)和NHS(10 eq),室温搅拌30 min。
加入含氨基的目标分子(如抗体,1.2 eq),4℃反应12 h,透析纯化。
活化效率:羧基转化率>95%,偶联产物收率>80%。
点击化学扩展:
羧基-叠氮转化:通过HBTU/DIEA将羧基转为叠氮基团,后续与炔基修饰分子进行CuAAC反应。
2. 纳米载体制备
脂质体修饰:
制备DPPC:Chol:DSPE-PEG2000脂质体(摩尔比70:25:5)。
加入6ARM-PEG-COOH(5 mol%相对于总脂质),50℃孵育1 h,通过挤出法制备均一脂质体。
动态光散射(DLS)测定粒径(约120 nm),Zeta电位(-15 mV)。
水凝胶合成:
称取6ARM-PEG-COOH(100 mg)和6ARM-PEG-NH₂(100 mg),溶于PBS(pH 7.4)。
混合后立即注入模具,37℃孵育30 min形成凝胶,压缩模量约50 kPa。
3. 储存与稳定性优化
短期储存:4℃避光保存(<1个月),避免反复冻融。
长期储存:冻干后密封,-20℃保存(>1年),使用前复溶并检测羧基活性。
抗氧化:添加0.1% BHT(2,6-二叔丁基对甲酚)抑制羧基氧化。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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