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产品名称:NHS-PEG-COOH,活性酯PEG羧基
实验操作指南
生物偶联反应
步骤:
将NHS-PEG-COOH(1 eq)溶于DMSO,加入含氨基的分子(如抗体,1.2 eq)和pH 7.4的PBS(总体积10% DMSO)。
室温搅拌30分钟,离心纯化(MWCO 10 kDa),去除未反应试剂。
注意事项:
反应需在pH 7-8下进行(NHS酯在酸性条件下失活)。
抗体浓度需≥1 mg/mL(避免粘壁损失)。
水凝胶制备
步骤:
将NHS-PEG-COOH(5 wt%)与含氨基的聚合物(如明胶,10 wt%)溶于PBS(pH 7.4)。
混合后迅速注入模具,37°C孵育1小时形成凝胶。
注意事项:
交联剂比例需优化(NHS-PEG-COOH过高会导致凝胶脆性增加)。
凝胶需在PBS中平衡24小时以去除未反应试剂。
表征方法
偶联效率:HPLC或SDS-PAGE(比较反应前后分子量变化)。
水凝胶性能:流变仪测定储能模量(G')和损耗模量(G'')。
靶向效率:流式细胞术或共聚焦显微镜(比较靶向组与非靶向组的细胞摄取差异)。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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