英文名称: Rhodamine B-Kassinin, RB-DVPKSDQFVGLM-NH₂
中文名称: 罗丹明RB荧光标记卡西宁(Kassinin)
序列: DVPKSDQFVGLM-NH₂
分子量: 约 2,500 Da(含罗丹明RB标记)
C端修饰: 酰胺化(-NH₂)
1. 背景与核心特性
Kassinin的生物学功能:
受体结合:Kassinin通过激活速激肽受体NK₃(TACR3)调控多种生理过程,包括胃肠道运动、痛觉传递、免疫调节及神经内分泌功能。
信号转导:NK₃受体属于G蛋白偶联受体(GPCR),激活后通过PLC/IP₃/DAG通路调节细胞内钙离子浓度,或通过MAPK通路调控基因表达。
Kassinin 是一种由11个氨基酸组成的速激肽(Tachykinin)家族成员,最初从非洲爪蟾皮肤中分离,后在哺乳动物(如人类)中发现其同源物(如神经激肽B, NKB)。
作用机制:
罗丹明RB标记的优势:
高荧光量子产率:适合低浓度检测(如细胞实验中10-100 nM)。
光稳定性:适合长时间成像(如活细胞动态追踪)。
pH不敏感:在生理pH(7.0-7.4)下荧光强度稳定。
罗丹明RB 是一种经典荧光染料,具有以下特性:
RB-Kassinin 通过化学偶联将罗丹明RB标记在Kassinin的N端或侧链氨基上,在保留其生物活性的同时赋予荧光特性,便于实时追踪多肽在细胞或组织中的分布及动态变化。
2. 主要应用方向
胃肠道功能研究
在DSS诱导的结肠炎小鼠模型中,通过RB-Kassinin追踪多肽在炎症部位的分布变化,研究NK₃受体在肠道炎症中的作用。
离体实验:在离体肠段或结肠环实验中,通过RB-Kassinin观察多肽对平滑肌收缩的影响,结合荧光信号量化受体激活后的生理效应。
活体成像:在小鼠肠道内注射RB-Kassinin,通过荧光内窥镜观察多肽在肠道中的分布及与NK₃受体的结合情况,解析其调控胃肠动力的机制。
痛觉与神经病理性疼痛研究
利用RB-Kassinin作为工具分子,通过竞争性结合实验或功能实验(如钙流检测)筛选针对NK₃受体的候选药物(如拮*剂或激动剂)。
在脊髓背角或背根神经节(DRG)中,通过RB-Kassinin观察多肽在痛觉传递通路中的分布,解析NK₃受体在神经病理性疼痛中的作用。
示例:在坐骨神经结扎(CCI)模型中,通过活体成像观察RB-Kassinin在脊髓中的信号变化,研究其与痛觉过敏或异常性疼痛的相关性。
神经内分泌与精神疾病研究
在慢性应激或社交挫败模型中,通过活体成像观察RB-Kassinin在杏仁核、海马或前额叶皮层的分布变化,解析NK₃受体在情绪调节中的作用。
在下丘脑或垂体细胞中,通过RB-Kassinin观察多肽对促性腺激素释放激素(GnRH)分泌的影响,研究NK₃受体在生殖功能调控中的作用。
免疫调节研究
在多发性硬化症(EAE)模型中,通过RB-Kassinin追踪多肽在中枢神经系统中的分布,解析NK₃受体在免疫细胞浸润或神经炎症中的作用。
在巨噬细胞或树突状细胞中,通过RB-Kassinin观察多肽对细胞因子(如TNF-α、IL-6)分泌的影响,研究NK₃受体在免疫反应中的作用。
3. 实验技术要点
荧光稳定性优化
避光操作:实验全程在暗室或弱光条件下进行,防止罗丹明RB光漂白。
缓冲液优化:使用含0.1% BSA的PBS缓冲液(pH 7.4),减少非特异性吸附;避免使用还原剂(如DTT),因其可能破坏罗丹明RB的荧光特性。
非特异性信号控制
阴性对照:设置未标记Kassinin或无关荧光肽作为对照,优化孵育浓度(通常10 nM-1 μM)及洗涤步骤(如3× PBS冲洗)。
细胞实验:在HEK293细胞中过表达NK₃受体,通过共聚焦显微镜观察RB-Kassinin的细胞内分布(如质膜、胞质或内体)。
活性验证
通过放射性配体结合实验或表面等离子共振(SPR)技术,测定RB-Kassinin与NK₃受体的亲和力(Kd值)。
通过钙流检测或cAMP积累实验,确认罗丹明RB标记未显著降低Kassinin的生物活性。
示例:在表达NK₃受体的CHO细胞中,比较RB-Kassinin与未标记Kassinin诱导的钙离子浓度变化。
包装形式: 瓶装
规格选择: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存条件: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司是一家专注于靶向药物递送的企业。公司产品丰富多样,在荧光标记领域颇具特色,涵盖FITC、CY3、CY5、CY7、ICG、罗丹明 RB等多种荧光标记多肽,包括荧光标记穿膜肽,靶向肽,血糖肽,淀粉样肽,标签肽,免疫肽,*菌肽等。广泛应用于生物医学研究、细胞成像等多个方向。同时,其业务范围还拓展至纳米材料、PEG 衍生物、生物素标记物等产品,为科研工作者提供多样化选择。
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