英文名称: CY5-BMAP-27, CY5-labeled Bovine Myeloid Antimicrobial Peptide 27
中文名称: CY5荧光标记牛髓系*菌肽27(BMAP-27)
序列: GRFKRFRKKFKKLFKKLSPVIPLLHLG
分子量: 约 3,800 Da(含CY5标记)
C端修饰: 游离羧基(-COOH)
1. 背景与核心特性
BMAP-27的生物学功能:
膜破坏:BMAP-27通过静电相互作用与细菌细胞膜结合,形成孔道或破坏膜完整性,导致细胞内容物泄漏。
免疫调节:BMAP-27可诱导宿主免疫细胞(如单核细胞、中性粒细胞)的趋化性,增强*菌免疫反应。
*肿瘤活性:部分研究显示BMAP-27对某些肿瘤细胞具有选择性细胞毒作用,可能通过诱导凋亡或自噬实现。
*菌肽(AMP):BMAP-27是从牛髓系细胞中分离的一种阳离子*菌肽,属于Cathelicidin家族,具有广谱*菌活性(对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌及部分病毒有效)。
CY5标记的优势:
通过化学偶联将CY5标记在BMAP-27的N端或侧链氨基上,在保留其*菌活性的同时赋予荧光特性,便于实时追踪多肽在细胞、组织或活体中的分布及动态变化。
激发/发射波长:649 nm(激发)/666 nm(发射),属于近红外光谱区,具有以下特点:
组织穿透深:适合活体成像及深层组织检测。
背景信号低:生物样本的自发荧光干扰小。
光稳定性好:适合长时间成像实验。
2. 主要应用方向
*菌机制研究
在耐药菌株(如MRSA)中研究CY5-BMAP-27的*菌活性及作用机制,解析其与*生素联用的协同效应。
在细菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)与CY5-BMAP-27共孵育后,通过共聚焦显微镜观察多肽在细菌膜上的定位及动态变化,解析其膜破坏机制。
示例:通过时间序列成像观察CY5信号在细菌膜上的聚集及膜完整性破坏(如PI染色或SYTOX Green荧光渗漏)。
活体*菌成像
通过活体成像追踪CY5-BMAP-27在血液、肝脏、肾脏等器官中的清除速率及分布规律,优化给药剂量及频率。
在小鼠皮肤感染或肺部感染模型中,通过尾静脉或局部注射CY5-BMAP-27,利用活体成像系统(IVIS)观察多肽在感染部位的富集及*菌效果。
示例:在金黄色葡萄球菌皮肤脓肿模型中,比较CY5-BMAP-27与未标记BMAP-27的*菌活性及组织分布差异。
*肿瘤活性研究
在小鼠异种移植瘤模型中,通过活体成像观察CY5-BMAP-27在肿瘤部位的富集及*肿瘤效果,评估其作为新型*肿瘤药物的潜力。
在肿瘤细胞系(如乳腺癌、黑色素瘤)中,通过共聚焦显微镜观察CY5-BMAP-27的细胞摄取及亚细胞定位(如细胞膜、线粒体或细胞核)。
通过流式细胞术或Western blot分析多肽诱导的肿瘤细胞凋亡(如Caspase-3激活)或自噬(如LC3-II表达上调)。
在LPS诱导的急性肺损伤或肠炎模型中,通过活体成像或组织切片观察CY5-BMAP-27在炎症部位的分布及对炎症细胞浸润的影响。
在单核细胞或中性粒细胞中,通过迁移实验(如Transwell)观察CY5-BMAP-27诱导的细胞趋化性,结合荧光信号量化趋化效率。
3. 实验技术要点
荧光稳定性优化
避光操作:实验全程在暗室或弱光条件下进行,防止CY5光漂白。
缓冲液优化:使用含0.1% BSA的PBS缓冲液(pH 7.4),减少非特异性吸附;避免使用还原剂(如DTT),因其可能破坏CY5的荧光特性。
非特异性信号控制
阴性对照:设置未标记BMAP-27或无关荧光肽作为对照,优化孵育浓度(通常1-10 μM)及洗涤步骤(如3× PBS冲洗)。
细胞实验:在细菌或肿瘤细胞中,通过共聚焦显微镜观察CY5-BMAP-27的特异性结合(如与膜染料DiI共定位)。
活性验证
在哺乳动物细胞(如HEK293)中,通过MTT或LDH释放实验,评估CY5-BMAP-27的细胞毒性,确保其生物安全性。
通过最小抑菌浓度(MIC)实验或菌落计数法,确认CY5标记未显著降低BMAP-27的*菌活性。
4. 总结与展望
研究价值:
CY5-BMAP-27结合了荧光追踪与*菌活性,为深入探索BMAP-27的*菌机制、活体药代动力学及*肿瘤潜力提供了高灵敏度的可视化工具。其在新型*菌药物开发、感染性疾病诊断及肿瘤免疫治疗中具有重要应用价值。未来方向:
随着*菌肽研究的深入及活体成像技术的发展,CY5-BMAP-27有望推动以下领域的发展:精准*菌治疗:开发针对特定病原体的BMAP-27衍生物,减少*生素滥用。
肿瘤免疫治疗:探索BMAP-27作为免疫调节剂在肿瘤微环境中的作用机制。
多模态成像:将CY5-BMAP-27与MRI或PET显像剂联用,实现感染或肿瘤部位的精准定位及动态监测。
包装形式: 瓶装
规格选择: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存条件: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司是一家专注于靶向药物递送的企业。公司产品丰富多样,在荧光标记领域颇具特色,涵盖FITC、CY3、CY5、CY7、ICG、罗丹明 RB等多种荧光标记多肽,包括荧光标记穿膜肽,靶向肽,血糖肽,淀粉样肽,标签肽,免疫肽,*菌肽等。广泛应用于生物医学研究、细胞成像等多个方向。同时,其业务范围还拓展至纳米材料、PEG 衍生物、生物素标记物等产品,为科研工作者提供多样化选择。
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