一、核心结构与生物学背景
ACE抑制肽-8(VPP)的天然特性
VPP通过竞争性结合ACE的活性位点,阻断血管紧张素Ⅰ(Ang I)向血管紧张素Ⅱ(Ang II)的转化,从而降低血管收缩效应和血压。
其作用机制可能与肽链的β-转角结构有关,该结构能高效适配ACE的疏水口袋,增强结合亲和力。
来源与序列:VPP(Val-Pro-Pro)是一种源自乳蛋白(如酪蛋白)的三肽,分子量约为270 Da,属于短链ACE抑制肽。
降压活性:体外实验显示,VPP对ACE的IC₅₀值约为5–10 μM,活性显著高于大多数长链ACE抑制肽,且无显著细胞毒性或副作用。
CY5荧光标记策略
CY5的激发/发射波长为649 nm/670 nm,发射远红外荧光,适用于深层组织成像和体内长时程追踪。
与CY3(橙红色荧光)相比,CY5的波长更长,组织穿透性更强,背景荧光干扰更低。
标记位点:CY5通过NHS酯与VPP的N端氨基共价结合,形成CY5-VPP,保留原肽的ACE抑制活性。
功能验证:标记后肽的ACE抑制活性与未标记肽相比无明显差异(IC₅₀变化≤5%),证明CY5标记未显著干扰其生物功能。
二、应用场景与技术优势
降压机制与靶向性研究
利用远红外荧光显微镜观察VPP在主动脉或肾脏组织中的分布,发现其优先结合于血管内皮层和肾小球毛细血管(ACE高表达区域),验证其靶向性。
在血管内皮细胞(如HUVECs)中,通过CY5荧光追踪VPP的跨膜转运及胞内定位,验证其是否通过内吞作用进入细胞或直接作用于细胞膜上的ACE。
结合共聚焦显微镜,观察VPP在细胞膜上的动态结合过程,发现其优先富集于脂筏区域(ACE高表达亚结构域)。
药物递送与缓释系统开发
利用荧光强度变化监测VPP从水凝胶或微球中的释放行为,优化药物释放曲线。例如,通过pH敏感型载体设计,实现VPP在肠道(pH 6.8)的缓慢释放和在胃液(pH 1.5–3.5)中的稳定性。
将CY5-VPP作为靶向分子修饰于脂质体或聚合物纳米粒表面,通过荧光信号评估载体在血管壁的富集效率。
例如,在高血压动物模型中,CY5标记的纳米粒在主动脉的荧光强度较未标记组高4–6倍,证明其靶向递送能力。
高通量筛选与活性优化
对比不同序列修饰的CY5标记肽的荧光信号与ACE抑制活性,发现β-转角结构(如Pro-Pro二肽)是维持高活性的关键。
在96孔板中,通过CY5标记肽与ACE反应后的荧光信号变化,快速筛选高活性ACE抑制肽变体(如通过氨基酸替换或环化修饰序列)。
例如,将VPP的Val替换为Leu(LPP)后,CY5-LPP的ACE抑制活性提高20%,且荧光信号强度未受影响。
三、技术挑战与改进方向
标记稳定性与体内代谢
采用更稳定的荧光基团(如CY7.5,激发/发射波长788 nm/808 nm)或结合点击化学(Click Chemistry)实现体内原位标记。
引入PEG链或白蛋白结合结构域(如Abraxane中的白蛋白纳米粒技术),延长标记肽的半衰期。
挑战:CY5在体内可能被血清蛋白结合或代谢清除,导致荧光信号衰减。
体内成像深度与分辨率限制
改用近红外二区荧光染料(如IR-1061,激发/发射波长980 nm/1061 nm)或结合光声成像技术,提升成像深度。
联合MRI或PET成像,开发多模态探针(如CY5-VPP-Gd³⁺),实现解剖结构与功能信息的同步获取。
挑战:CY5的荧光波长(670 nm)虽优于CY3,但在深层组织(如心脏、肾脏)中仍可能受到散射和吸收影响。
多靶点协同作用与机制验证
将CY5-VPP与其他荧光标记分子(如绿色荧光标记的利尿肽或抗氧化肽)联合使用,通过双色荧光成像观察多肽在体内的协同降压机制。
结合基因敲除动物模型(如ACE基因敲除小鼠),验证VPP对RAS(肾素-血管紧张素系统)的特异性抑制作用。
包装形式: 瓶装
规格选择: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存条件: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司是一家专注于靶向药物递送的企业。公司产品丰富多样,在荧光标记领域颇具特色,涵盖FITC、CY3、CY5、CY7、ICG、罗丹明 RB等多种荧光标记多肽,包括荧光标记穿膜肽,靶向肽,血糖肽,淀粉样肽,标签肽,免疫肽,*菌肽等。广泛应用于生物医学研究、细胞成像等多个方向。同时,其业务范围还拓展至纳米材料、PEG 衍生物、生物素标记物等产品,为科研工作者提供多样化选择。
相关产品:
CY5-FFVAPFPEVFGK
CY5-IPP
CY5-ACE抑制肽-13
CY5-ACE抑制肽-14
CY5-ACE抑制肽-15
CY5-PAMP-12
CY5-Neurotensin (8-13)
CY5-Neurotensin
CY5-ACE抑制肽-1