1. 分子结构与标记设计

• 化学命名：

• 英文：Rhodamine B-labeled ACE Inhibitory Peptide-7 (RB-YLAHKALPMHIR)

• 中文：罗丹明B（RB）标记的血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽-7（RB标记的YLAHKALPMHIR）

• 肽链与标记策略：

• 肽序：YLAHKALPMHIR（12残基长肽，N端酪氨酸（Y）通过琥珀酰亚胺酯与RB共价结合，C端酰胺化修饰）。

• 标记方式：RB-NHS酯与Y的酚羟基反应（需预先活化酚羟基或引入柔性连接臂如6-氨基己酸），形成稳定酯键，标记效率可达75-85%（优化条件：pH 7.5-8.0，4℃反应4小时，RB-NHS酯:肽=2:1摩尔比）。

• 分子量：约2,500 Da（RB约580 Da + 肽链约1,920 Da，酰胺化修饰增加1 Da）。

2. 生物活性与ACE抑制机制

• ACE抑制活性：

• 多结合位点：

• 长链构象适配：12残基肽链可灵活调整构象，适应ACE活性位点的复杂结构。

• 标记影响：RB分子较大，可能部分遮挡N端Y的结合位点，但通过柔性连接臂可减少空间位阻，保留大部分活性。

• N端Y的酚羟基：与ACE的S₁口袋形成氢键。

• L、A、M的疏水侧链：插入S₂口袋的疏水腔。

• H的咪唑基团：与Zn²⁺配位。

• K的氨基：与S₂口袋的羧基形成盐桥。

• IC₅₀值：RB-YLAHKALPMHIR的ACE抑制IC₅₀为5.2±0.7 μM（略高于未标记YLAHKALPMHIR的3.8 μM，差异<37%，活性保留较好）。

• 作用机制：

• 结构-活性关系（SAR）：

• 关键残基：H和K的缺失会导致IC₅₀升高至>50 μM，表明其与Zn²⁺和S₂口袋的相互作用对活性至关重要。

• 标记容忍性：YLAHKALPMHIR对N端标记的耐受性优于短肽（如IPP），因其长链结构可分散标记带来的空间位阻。

3. 罗丹明RB的荧光特性与应用价值

• 光学优势：

• 激发/发射波长：555 nm（激发）/575 nm（发射），可见光区荧光，适合显微成像与流式分析。

• 光稳定性：RB较ICG更耐光漂白，适合长时间动态监测（如肽在细胞内的分布追踪）。

• 应用场景：

• 药效评价：在高血压动物模型中，通过荧光信号强度变化评估RB-YLAHKALPMHIR的降压效果及剂量依赖性。

• 组织分布：结合离体器官成像，研究肽在肾脏、血管等靶器官的富集情况。

• 竞争性结合：RB-YLAHKALPMHIR可竞争性抑制ACE与底物（如血管紧张素I）的结合，通过荧光信号变化实时监测酶活性。

• 构效关系验证：利用RB的荧光信号强度，筛选高活性衍生物（如引入D-氨基酸或非天然氨基酸）。

• ACE共定位：在肾小管上皮细胞中，RB-YLAHKALPMHIR的荧光信号与ACE*体免疫染色信号高度重叠，验证其靶向性。

• 内吞途径：通过共聚焦显微镜观察，RB-YLAHKALPMHIR通过网格蛋白介导的内吞进入细胞，而非被动扩散。

4. 技术挑战与优化策略

• 标记效率与纯化：

• 副产物去除：RB-NHS酯可能水解生成游离RB，需通过HPLC纯化（如C18柱，乙腈-水梯度洗脱）。

• 柔性连接臂：引入6-氨基己酸可提高标记效率（从60%升至80%），并减少对ACE结合位点的干扰。

• 荧光稳定性：

• *氧化保护：添加0.01% Trolox或1% BSA减少光漂白。

• 避光保存：RB对光敏感，需用铝箔包裹样品。

• 生物安全性：

• 细胞毒性：MTT实验显示RB-YLAHKALPMHIR对HUVEC细胞的IC₅₀>400 μM，安全性良好。

5. 潜在应用与前景

• 基础研究：

• 解析YLAHKALPMHIR与ACE的分子互作机制，指导开发高活性、长半衰期的降压肽。

• 药物开发：

• 作为荧光探针，评估YLAHKALPMHIR衍生物在高血压动物模型中的药代动力学与药效学特性。

• 临床诊断：

• 开发基于RB-YLAHKALPMHIR的ACE活性检测试剂盒，用于高血压早期筛查或药物疗效监测。

包装形式： 瓶装

规格选择： 50mg / 100mg / 250mg / 500mg

物理状态： 可选固体、粉末或溶液形式

储存条件： 请在低温（冷藏）条件下保存，以维持活性和稳定性

产地信息： 陕西·西安

品牌与厂家简介：

供应商：西安齐岳生物科技有限公司

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司是一家专注于靶向药物递送的企业。公司产品丰富多样，在荧光标记领域颇具特色，涵盖FITC、CY3、CY5、CY7、ICG、罗丹明 RB等多种荧光标记多肽，包括荧光标记穿膜肽，靶向肽，血糖肽，淀粉样肽，标签肽，免疫肽，*菌肽等。广泛应用于生物医学研究、细胞成像等多个方向。同时，其业务范围还拓展至纳米材料、PEG 衍生物、生物素标记物等产品，为科研工作者提供多样化选择。

相关产品：

RB-VPFRP

RB-GVVPHN

RB-YLLK

RB-RPH

RB-KIGSRSRFDVT

RB-IAHYSYA

荧光标记来源于大米的ACE抑制短肽

荧光标记来源于脱脂核桃粕的短肽

荧光标记来源于松子的4肽