中文名称:生物素-辣根过氧化物酶-亲和素复合物(HRP-Avidin)
英文名称:Biotin-HRP-Avidin Complex
分子组成与结构特点
核心组分
辣根过氧化物酶(HRP):
一种来源于辣根的氧化还原酶,分子量约44 kDa,催化过氧化氢(H₂O₂)氧化底物(如TMB、DAB),产生可检测的信号(颜色、荧光或化学发光)。亲和素(Avidin):
一种糖蛋白,分子量约66 kDa,对生物素(Biotin)具有极高的亲和力(解离常数Kd≈10⁻¹⁵ M),每个亲和素分子可结合4个生物素分子。生物素(Biotin):
一种小分子维生素(维生素B7),通过化学修饰可与HRP或*体、核酸等分子偶联,形成生物素化探针。复合物结构
Biotin-HRP:
生物素通过共价键与HRP偶联,形成生物素化HRP(Biotin-HRP)。HRP-Avidin复合物:
生物素化HRP通过生物素-亲和素高亲和力结合,与游离或生物素化的亲和素形成复合物。多价结合特性:
每个亲和素分子可结合4个生物素化HRP,形成“多酶复合物”,显著放大检测信号。
作用机制与信号放大原理
生物素-亲和素桥接
特异性结合:
生物素化HRP通过生物素与亲和素的结合,将HRP定向递送至目标分子(如*体、核酸探针)附近。多酶级联反应:
每个亲和素分子可结合多个HRP,形成“酶簇”,在催化底物时产生指数级信号放大。信号放大效应
传统直接标记 vs. 复合物标记:
方法 信号强度 灵敏度 适用场景 直接HRP标记*体 1x 低 常规免疫检测 Biotin-HRP-Avidin复合物 10⁴-10⁶x 高 超敏检测、单分子成像 催化底物反应
显色底物(如TMB):
HRP催化H₂O₂氧化TMB,生成蓝色产物,适用于ELISA等比色检测。化学发光底物(如ECL):
HRP催化鲁米诺(Luminol)与H₂O₂反应,产生高强度化学发光,适用于Western blot、免疫组化等高灵敏度检测。
应用领域与技术优势
免疫检测技术
ELISA(酶联免疫吸附试验):
将生物素化*体与HRP-Avidin复合物结合,显著提高检测灵敏度,适用于低丰度蛋白(如细胞因子、肿瘤标志物)的定量分析。免疫组化(IHC):
通过生物素化二*与HRP-Avidin复合物结合,增强组织切片中*原的信号强度,提高病理诊断的准确性。核酸杂交检测
原位杂交(ISH):
将生物素化核酸探针与HRP-Avidin复合物结合,检测细胞或组织中的特定RNA或DNA序列,适用于基因表达分析、病原体检测。Southern/Northern blot:
通过生物素化探针与HRP-Avidin复合物结合,提高核酸杂交信号的检测灵敏度。细胞成像与流式细胞术
免疫荧光成像:
将生物素化荧光*体与HRP-Avidin复合物结合,通过HRP催化底物产生沉淀(如DAB),实现高分辨率的细胞内*原定位。流式细胞术:
通过生物素化*体与HRP-Avidin复合物结合,结合化学发光检测,提高多参数流式分析的灵敏度。
技术优势与局限性
优势
超高灵敏度:
通过多酶级联反应,信号放大倍数可达10⁴-10⁶,适用于痕量分析。稳定性高:
生物素-亲和素结合在极端pH、温度条件下仍保持稳定,适用于复杂样本检测。模块化设计:
可通过生物素化修饰将HRP与任意分子(如*体、核酸、多肽)偶联,灵活性高。局限性
非特异性结合风险:
亲和素可能与样本中的内源性生物素(如组织中的生物素化蛋白)结合,导致背景信号升高。空间位阻:
多酶复合物可能影响HRP与底物的接触效率,尤其是在高密度标记时。成本较高:
生物素化试剂和HRP-Avidin复合物的制备成本高于传统直接标记方法。
包装: 瓶装
规格: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技,我们专注于各类生物科技专用维生素的研发与生产,凭借先进的工艺和专业的团队,打造出良好产品。我们的主打产品丰富多样,生物素化药物及前体,为药物研发与应用提供有力支持;氨基酸类生物素化产品,满足特定领域的需求;生物素化多肽,在生物研究中大放异彩。我们以匠心雕琢每一克原料,让维生素化身生命科学的全能桥梁。从科研探索到产业应用,我们持续解锁生物分子的无限可能,用智慧与精工推动生命科学跃迁。
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