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​Biotin-HRP-Avidin复合物,生物素-辣根过氧化物酶-亲和素系统在生物检测与成像中的应用
发布时间:2025-05-16     作者:YFF   分享到:

中文名称:生物素-辣根过氧化物酶-亲和素复合物(HRP-Avidin)

英文名称:Biotin-HRP-Avidin Complex

分子组成与结构特点

  1. 核心组分

    • 辣根过氧化物酶(HRP):
      一种来源于辣根的氧化还原酶,分子量约44 kDa,催化过氧化氢(H₂O₂)氧化底物(如TMB、DAB),产生可检测的信号(颜色、荧光或化学发光)。

    • 亲和素(Avidin):
      一种糖蛋白,分子量约66 kDa,对生物素(Biotin)具有极高的亲和力(解离常数Kd≈10⁻¹⁵ M),每个亲和素分子可结合4个生物素分子。

    • 生物素(Biotin):
      一种小分子维生素(维生素B7),通过化学修饰可与HRP或*体、核酸等分子偶联,形成生物素化探针。

  2. 复合物结构

    • Biotin-HRP:
      生物素通过共价键与HRP偶联,形成生物素化HRP(Biotin-HRP)。

    • HRP-Avidin复合物:
      生物素化HRP通过生物素-亲和素高亲和力结合,与游离或生物素化的亲和素形成复合物。

    • 多价结合特性:
      每个亲和素分子可结合4个生物素化HRP,形成“多酶复合物”,显著放大检测信号。

作用机制与信号放大原理

  1. 生物素-亲和素桥接

    • 特异性结合:
      生物素化HRP通过生物素与亲和素的结合,将HRP定向递送至目标分子(如*体、核酸探针)附近。

    • 多酶级联反应:
      每个亲和素分子可结合多个HRP,形成“酶簇”,在催化底物时产生指数级信号放大。

  2. 信号放大效应

    • 传统直接标记 vs. 复合物标记:


      方法信号强度灵敏度适用场景
      直接HRP标记*体1x常规免疫检测
      Biotin-HRP-Avidin复合物10⁴-10⁶x超敏检测、单分子成像


  3. 催化底物反应

    • 显色底物(如TMB):
      HRP催化H₂O₂氧化TMB,生成蓝色产物,适用于ELISA等比色检测。

    • 化学发光底物(如ECL):
      HRP催化鲁米诺(Luminol)与H₂O₂反应,产生高强度化学发光,适用于Western blot、免疫组化等高灵敏度检测。

应用领域与技术优势

  1. 免疫检测技术

    • ELISA(酶联免疫吸附试验):
      将生物素化*体与HRP-Avidin复合物结合,显著提高检测灵敏度,适用于低丰度蛋白(如细胞因子、肿瘤标志物)的定量分析。

    • 免疫组化(IHC):
      通过生物素化二*与HRP-Avidin复合物结合,增强组织切片中*原的信号强度,提高病理诊断的准确性。

  2. 核酸杂交检测

    • 原位杂交(ISH):
      将生物素化核酸探针与HRP-Avidin复合物结合,检测细胞或组织中的特定RNA或DNA序列,适用于基因表达分析、病原体检测。

    • Southern/Northern blot:
      通过生物素化探针与HRP-Avidin复合物结合,提高核酸杂交信号的检测灵敏度。

  3. 细胞成像与流式细胞术

    • 免疫荧光成像:
      将生物素化荧光*体与HRP-Avidin复合物结合,通过HRP催化底物产生沉淀(如DAB),实现高分辨率的细胞内*原定位。

    • 流式细胞术:
      通过生物素化*体与HRP-Avidin复合物结合,结合化学发光检测,提高多参数流式分析的灵敏度。

技术优势与局限性

  1. 优势

    • 超高灵敏度:
      通过多酶级联反应,信号放大倍数可达10⁴-10⁶,适用于痕量分析。

    • 稳定性高:
      生物素-亲和素结合在极端pH、温度条件下仍保持稳定,适用于复杂样本检测。

    • 模块化设计:
      可通过生物素化修饰将HRP与任意分子(如*体、核酸、多肽)偶联,灵活性高。

  2. 局限性

    • 非特异性结合风险:
      亲和素可能与样本中的内源性生物素(如组织中的生物素化蛋白)结合,导致背景信号升高。

    • 空间位阻:
      多酶复合物可能影响HRP与底物的接触效率,尤其是在高密度标记时。

    • 成本较高:
      生物素化试剂和HRP-Avidin复合物的制备成本高于传统直接标记方法。

Biotin-HRP-Avidin复合物,生物素-辣根过氧化物酶-亲和素系统在生物检测与成像中的应用

包装: 瓶装

规格: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg

物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式

储存: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性

产地信息: 陕西·西安

品牌与厂家简介:

供应商:西安齐岳生物科技有限公司

关于我们:

西安齐岳生物科技,我们专注于各类生物科技专用维生素的研发与生产,凭借先进的工艺和专业的团队,打造出良好产品。我们的主打产品丰富多样,生物素化药物及前体,为药物研发与应用提供有力支持;氨基酸类生物素化产品‌,满足特定领域的需求;生物素化多肽,在生物研究中大放异彩。我们以匠心雕琢每一克原料,让维生素化身生命科学的全能桥梁。从科研探索到产业应用,我们持续解锁生物分子的无限可能,用智慧与精工推动生命科学跃迁。

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