cas:2182602-20-4,Mal-amido-PEG9-NHBoc的反应步骤
Mal-amido-PEG9-NHBoc是一种含马来酰亚胺(Mal)和 Boc 保护氨基的 PEG 连接剂,结构如下:
马来酰亚胺基团(-Mal):位于分子一端,可与巯基(-SH)在中性 pH 下特异性反应,形成稳定的硫醚键,常用于蛋白质或多肽的定点修饰;
PEG9 链:九聚乙二醇(约 400 Da),提供亲水性和空间位阻;
NHBoc 基团:另一端氨基被叔丁氧羰基(Boc)保护,可通过酸(如 TFA)脱除,释放游离氨基(-NH₂)。
分子呈线性,水溶性良好,适用于水相反应体系,Mal 基团对巯基的选择性高于氨基,可实现位点特异性偶联。
反应步骤
巯基偶联(Mal-SH 反应)
条件:pH 6.5-8.5(佳 pH 7.5-8.0),室温或 4℃,缓冲液(如 PBS、HEPES),避免巯基还原剂(如 DTT)。
机制:马来酰亚胺双键与巯基发生迈克尔加成反应,生成稳定的硫醚连接,无需催化剂,反应快速(数分钟至 1 小时),适用于抗体、酶等含半胱氨酸残基的生物分子修饰。
Boc 脱保护
条件:加入三氟乙酸(TFA)/ 二氯甲烷(DCM)溶液(体积比 1:1),室温反应 15-30 分钟;
后处理:用碱(如饱和 NaHCO₃)中和,或通过柱层析除去 TFA,释放的氨基可进一步与羧基、醛基等反应,或引入其他官能团(如叠氮、荧光基团)。
分步偶联策略
步:利用 Mal 基团与目标分子的巯基偶联,固定 PEG 链;
第二步:脱除 Boc 保护基,暴露氨基,用于后续偶联药物、成像探针或靶向配体(如通过 EDC/NHS 活化羧基)。
应用场景:
抗体 - 药物偶联物(ADC):Mal 与抗体巯基结合,NHBoc 脱保护后连接化疗药物(通过氨基 - 羧基缩合);
蛋白质荧光标记:Mal 偶联巯基化荧光探针,NHBoc 脱保护后引入生物素等报告基团;
双功能分子构建:通过 PEG 链分隔反应位点,避免空间位阻影响偶联效率。
名称:Mal-amido-PEG9-NHBoc
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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