英文名称：Biotin-Quercetin
中文名称：生物素-槲皮素
一、核心概念与结构解析
生物素（Biotin）
功能：作为亲和标签，通过与链霉亲和素（Streptavidin, SA）的高亲和力结合（Ka≈10¹⁵ M⁻¹），实现目标蛋白的富集与分离。
化学修饰位点：通常通过羧基（-COOH）或氨基（-NH₂）与药物分子（如槲皮素）共价连接。
槲皮素（Quercetin）
直接清除自由基（如ROS、RNS）。
诱导*氧化酶（如SOD、CAT、GPx）表达。
抑制促氧化酶（如NADPH氧化酶、xanthine oxidase）。
结构：天然黄酮类化合物，分子量302.24 Da，含多个酚羟基（-OH），赋予其强*氧化活性。
Biotin-Quercetin复合物
利用生物素的亲和特性，捕获槲皮素直接或间接作用的*氧化通路蛋白。
结合蛋白质组学技术（如质谱，MS）系统性鉴定*氧化靶点。
二、合成策略与化学修饰
化学偶联方法
若槲皮素修饰为炔基，生物素修饰为叠氮基，可通过CuAAC反应高效偶联（产率>90%）。
槲皮素的羧基衍生物（如槲皮素-3-O-羧甲基醚）与生物素的氨基通过EDC/NHS活化后缩合。
反应条件：pH 7.4、室温、2小时，产率约60-70%。
纯化与验证
质谱（MS）：检测分子离子峰（如Biotin-Quercetin理论分子量525.4）。
核磁共振（NMR）：确认生物素与槲皮素的连接位点（如3-OH位点）。
透析或柱层析（如Sephadex LH-20）去除未反应的小分子。
HPLC确认纯度（>95%）。
三、在*氧化通路蛋白筛选中的应用
靶标富集与蛋白质组学分析
直接靶点：Nrf2（核因子E2相关因子2，*氧化应激核心转录因子）。
间接靶点：Keap1（Nrf2抑制蛋白）、HO-1（血红素加氧酶-1）。
将Biotin-Quercetin与细胞裂解液孵育，槲皮素部分结合*氧化相关蛋白，生物素部分通过链霉亲和素磁珠捕获复合物。
洗脱蛋白后，通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）鉴定蛋白。
竞争性结合实验
预孵育游离槲皮素与细胞/蛋白，再加入Biotin-Quercetin，检测磁珠捕获量的减少，验证靶点特异性。
细胞内*氧化通路激活验证
将Biotin-Quercetin处理细胞后，通过Western blot检测Nrf2核转位及下游*氧化酶（如NQO1、GCLC）表达。
四、优势与挑战
优势
高亲和力捕获：生物素-链霉亲和素系统降低非特异性结合，提高靶标纯度。
多功能性：可结合多种检测技术（如荧光成像、ELISA）。
模块化设计：通过更换生物素化标签（如荧光基团、放射性同位素）扩展应用。
挑战
解决方案：缩短孵育时间或使用交联剂（如甲醛）固定蛋白-配体复合物。
解决方案：采用纳米载体（如脂质体）包裹复合物。
解决方案：优化裂解缓冲液（如添加RIPA缓冲液+蛋白酶抑制剂）或预清除非靶蛋白。
非特异性结合：细胞裂解液中的高丰度蛋白（如白蛋白）可能干扰靶标捕获。
槲皮素水溶性差：需通过衍生物（如槲皮素糖苷）提高溶解性，但可能影响靶点结合。
靶点动态变化：槲皮素可能诱导靶蛋白降解或构象改变，导致假阴性。
包装： 瓶装
规格： 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态： 可选固体、粉末或溶液形式
储存： 请在低温（冷藏）条件下保存，以维持活性和稳定性
产地信息： 陕西·西安
品牌与厂家简介：
供应商：西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技，我们专注于各类生物科技专用维生素的研发与生产，凭借先进的工艺和专业的团队，打造出良好产品。我们的主打产品丰富多样，生物素化药物及前体，为药物研发与应用提供有力支持；氨基酸类生物素化产品，满足特定领域的需求；生物素化多肽，在生物研究中大放异彩。我们以匠心雕琢每一克原料，让维生素化身生命科学的全能桥梁。从科研探索到产业应用，我们持续解锁生物分子的无限可能，用智慧与精工推动生命科学跃迁。
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