一、物质中英文名称及结构组成
(一)中英文名称
英文名称:FITC-Biotin-Fucoidan
中文名称:FITC-生物素-岩藻多糖
(二)结构组成
该复合物由三部分组成:
FITC(异硫氰酸荧光素):是一种常用的荧光染料,具有明亮的绿色荧光,激发波长约为 495 nm,发射波长约为 519 nm。它能够与含有氨基的分子发生共价结合,从而为标记物提供荧光信号,便于在荧光显微镜等设备下进行观察和检测。
Biotin(生物素):是一种水溶性维生素,具有与亲和素(avidin)或链霉亲和素(streptavidin)高亲和力、特异性结合的特性,这种结合的解离常数极低,稳定性高。生物素的引入为标记物提供了进一步的功能化修饰和结合的可能性。
岩藻多糖:是从褐藻中提取的一种硫酸多糖,具有多种生物活性,如*病毒、*肿瘤、免疫调节等。它在细胞表面和细胞外基质中广泛存在,能够与多种生物分子发生相互作用。
二、双重标记的原理及优势
(一)双重标记原理
FITC- Biotin-岩藻多糖的双重标记是指同时利用 FITC 的荧光特性和 Biotin 的亲和结合特性对岩藻多糖进行标记。FITC 通过化学反应与岩藻多糖上的氨基等基团共价结合,赋予岩藻多糖荧光信号;而 Biotin 也通过化学方法连接到岩藻多糖上,使其能够与后续引入的亲和素或链霉亲和素标记的分子发生特异性结合。
(二)优势
提高检测灵敏度:FITC 的荧光信号可以直接被荧光检测设备捕获,其明亮的荧光特性使得即使在低浓度的标记物存在下也能被检测到,大大提高了检测的灵敏度。
实现共定位分析:Biotin 可以与亲和素或链霉亲和素标记的其他分子(如荧光染料、酶等)结合,通过引入不同的标记物,可以在同一实验体系中同时检测岩藻多糖与其他目标分子的位置关系,实现共定位分析,为研究细胞内分子间的相互作用和分布提供了有力工具。
增强标记的稳定性和特异性:FITC 与岩藻多糖的共价结合以及 Biotin 与亲和素/链霉亲和素的高亲和力结合,保证了标记的稳定性和特异性,减少了非特异性信号的干扰,提高了实验结果的准确性。
三、在共定位分析中的应用
(一)细胞内分子共定位研究
应用场景:在研究细胞内岩藻多糖与其他生物分子(如蛋白质、核酸等)的相互作用和分布时,FITC - Biotin - 岩藻多糖可以发挥重要作用。例如,将标记后的岩藻多糖与细胞共同孵育,使其进入细胞内部。然后,利用 Biotin 与亲和素标记的另一种荧光染料(如红色荧光染料 Cy3)结合,通过荧光显微镜观察 FITC(绿色荧光)和 Cy3(红色荧光)的分布情况。如果两种荧光信号在细胞内的特定区域重叠,说明岩藻多糖与该区域存在的分子发生了共定位,可能存在相互作用。
意义:通过共定位分析,可以深入了解岩藻多糖在细胞内的代谢途径、信号传导机制以及与其他分子的相互作用网络,为揭示岩藻多糖的生物学功能提供重要线索。
(二)组织切片中的分子共定位研究
应用场景:在组织病理学研究中,FITC-Biotin-岩藻多糖可用于分析组织切片中岩藻多糖与特定组织成分或病变标志物的共定位关系。例如,在肿瘤组织切片中,标记岩藻多糖后,通过 Biotin 与亲和素标记的*体结合,*体可以特异性识别肿瘤相关*原(如 HER2、EGFR 等)。利用免疫荧光双标技术,同时检测 FITC 标记的岩藻多糖和*体标记的肿瘤*原的分布情况,判断岩藻多糖在肿瘤组织中的定位以及与肿瘤发生、发展的相关性。
意义:这种共定位分析有助于发现岩藻多糖在疾病诊断和治疗中的潜在应用价值,例如作为肿瘤标志物或治疗靶点的辅助诊断指标。
(三)病毒 - 宿主细胞相互作用研究
应用场景:在研究病毒与宿主细胞相互作用时,FITC - Biotin - 岩藻多糖可用于标记病毒或宿主细胞表面的岩藻多糖相关成分。例如,将标记后的岩藻多糖与病毒感染的宿主细胞共同孵育,观察其在病毒感染过程中的分布变化。同时,利用 Biotin 与亲和素标记的病毒特异性*体结合,通过共定位分析确定岩藻多糖与病毒在宿主细胞表面的结合位点和入侵途径。
意义:深入了解病毒 - 宿主细胞相互作用机制对于开发*病毒药物和疫苗具有重要意义,FITC - Biotin - 岩藻多糖为这方面的研究提供了新的技术手段。
四、制备方法及注意事项
(一)制备方法
岩藻多糖的活化:通常采用化学方法对岩藻多糖进行活化,使其分子上的羟基等基团转化为更活泼的反应性基团,如羧基、氨基等,以便与 FITC 和 Biotin 发生共价结合。常用的活化试剂包括碳二亚胺(EDC)、N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)等。
FITC 标记:将活化后的岩藻多糖与 FITC 在适当的缓冲液中反应,控制反应条件(如温度、pH 值、反应时间等),使 FITC 与岩藻多糖上的氨基发生共价结合。反应结束后,通过透析、超滤等方法除去未反应的 FITC。
Biotin 标记:采用类似的方法,将 Biotin 衍生物(如 Biotin - NHS 酯)与活化后的岩藻多糖反应,使 Biotin 连接到岩藻多糖上。同样,需要通过纯化步骤除去未反应的 Biotin 衍生物。
(二)注意事项
反应条件优化:FITC 和 Biotin 与岩藻多糖的反应条件需要仔细优化,以确保标记效率和标记物的生物活性。过高的反应温度或过长的反应时间可能会导致岩藻多糖的降解或标记物的失活。
纯化步骤:充分的纯化步骤对于获得高纯度的 FITC - Biotin - 岩藻多糖至关重要。未反应的 FITC 和 Biotin 衍生物会产生非特异性信号,干扰实验结果。可以采用透析、凝胶过滤色谱、离子交换色谱等方法进行纯化。
质量控制:在制备过程中,需要对标记物进行质量控制,包括检测标记效率(通过荧光光谱分析 FITC 的标记量,通过亲和素结合实验检测 Biotin 的标记量)、纯度(通过高效液相色谱、电泳等方法分析)和生物活性(通过细胞实验等评估其对细胞的影响)。
包装: 瓶装
规格: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
西安齐岳生物科技,我们专注于各类生物科技专用维生素的研发与生产,凭借先进的工艺和专业的团队,打造出良好产品。我们的主打产品丰富多样,生物素化药物及前体,为药物研发与应用提供有力支持;氨基酸类生物素化产品,满足特定领域的需求;生物素化多肽,在生物研究中大放异彩。我们以匠心雕琢每一克原料,让维生素化身生命科学的全能桥梁。从科研探索到产业应用,我们持续解锁生物分子的无限可能,用智慧与精工推动生命科学跃迁。
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