英文名称:Biotin-Labeled Cell Membrane Dyes
中文名称:生物素标记细胞膜染料
生物素标记细胞膜染料是一类通过化学修饰将生物素(Biotin)与细胞膜特异性荧光染料结合形成的探针分子,用于在细胞成像、流式细胞术、蛋白质相互作用分析或超分辨率显微镜等实验中标记和追踪细胞膜成分。其核心设计结合了生物素的高亲和力标记特性与细胞膜染料的靶向性,为细胞生物学研究提供了灵活且高效的工具。
1. 原理与功能
生物素特性:生物素与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)的结合亲和力极高(解离常数约10^-15 M),可通过亲和系统实现信号放大或二次标记(如连接荧光探针、酶或纳米颗粒)。
细胞膜靶向:染料部分通常为脂溶性分子(如DiI、DiO、FM系列)或*体偶联染料,能够特异性插入细胞膜磷脂双分子层或结合膜蛋白,从而标记细胞膜结构。
2. 类型与应用
根据染料与生物素的连接方式及用途,可分为以下类型:
类型 | 特点 | 应用场景 |
---|---|---|
脂溶性生物素染料 | 直接将生物素与亲脂性荧光团(如BODIPY、罗丹明)共价连接,通过被动扩散嵌入膜结构。 | 实时观察细胞膜流动性、膜融合或内吞过程;结合共聚焦显微镜分析膜动态变化。 |
生物素化*体染料 | 将生物素与*膜蛋白*体(如*CD4、CD29)结合,特异性标记膜表面*原。 | 流式细胞术分析细胞亚群;免疫荧光检测膜蛋白表达水平或定位。 |
点击化学兼容染料 | 生物素通过可裂解连接臂(如叠氮基、炔基)与染料结合,支持后续“点击化学”修饰。 | 多标记实验中与其他探针(如量子点、金属纳米簇)联用,实现多色成像。 |
3. 优势
高灵敏度:生物素-亲和素系统可放大信号,适用于低丰度膜成分的检测。
模块化设计:通过更换亲和素偶联物(如荧光素、酶、磁珠),可灵活切换检测方法。
低背景干扰:生物素标记的特异性结合减少了非靶向染色,提高图像/数据质量。
4. 实验注意事项
细胞活性:脂溶性染料可能影响膜通透性,需优化浓度(通常1–10 μM)和孵育时间(5–30分钟)。
对照设置:需设置未标记生物素的染料组及游离生物素竞争组,验证标记特异性。
多重标记:若需与其他探针联用,需确认染料光谱无重叠,并选择兼容的固定/通透方法。
5. 示例实验流程
细胞培养:将目标细胞(如HeLa、Jurkat)接种于共聚焦皿中,密度为5×10^4/cm²。
染色:加入生物素标记细胞膜染料(终浓度5 μM),37℃孵育15分钟。
洗涤:PBS清洗3次,去除未结合染料。
二次标记(可选):加入链霉亲和素-Alexa Fluor 488(1:200稀释),孵育10分钟。
成像:共聚焦显微镜观察(激发/发射波长根据染料选择,如BODIPY-Biotin为488/515 nm)。
包装: 瓶装
规格: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg
物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式
储存: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性
产地信息: 陕西·西安
品牌与厂家简介:
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
关于我们:
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