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Biotin-Thiol Coupling Reagent,生物素-硫醇偶联试剂的操作流程示例
发布时间:2025-05-21     作者:YFF   分享到:

产品名称:Biotin-Thiol Coupling Reagent,生物素-硫醇偶联试剂


生物素-硫醇偶联试剂是一类通过化学合成将生物素(Biotin)与硫醇反应性基团(如马来酰亚胺、碘乙酰胺或吡啶基二硫基)结合的分子工具,专门用于高效、特异性地将生物素标记至含巯基(-SH)的生物分子(如蛋白质、多肽、核酸或纳米颗粒)上。该试剂结合了生物素的强亲和特性与硫醇-反应基团的快速偶联能力,为生物标记、蛋白质组学研究、药物开发及生物传感等领域提供了灵活且高效的解决方案。

核心功能与优势

  1. 高效偶联

    • 硫醇反应性基团(如马来酰亚胺)可与巯基在温和条件下(如中性pH、室温)发生特异性共价结合,反应速率快(数分钟至数小时完成),且对非巯基基团无显著反应性。

    • 适用于含半胱氨酸残基的蛋白质、巯基修饰的核酸或表面含巯基的纳米材料等功能化。

  2. 生物素标记的通用性

    • 生物素与亲和素/链霉亲和素(如链霉亲和素磁珠、荧光标记的亲和素)的结合亲和力极高(Kd ≈ 10⁻¹⁵ M),可实现信号放大或目标分子的高效分离。

    • 标记后的生物分子可通过亲和素系统进行纯化、检测或与其他功能模块(如荧光探针、药物载体)偶联。

  3. 化学稳定性与生物相容性

    • 偶联产物(如生物素-蛋白质)在生理条件下稳定,适用于细胞实验或体内研究。

    • 试剂设计可避免对目标分子活性的显著影响(如蛋白质的酶活性或核酸的杂交能力)。

应用场景

  1. 蛋白质标记与纯化

    • 将生物素-硫醇试剂与含半胱氨酸的重组蛋白反应,通过链霉亲和素磁珠实现一步法纯化,替代传统亲和层析。

    • 示例:标记*体后用于免疫沉淀(IP)或Western blot检测。

  2. 生物传感与成像

    • 生物素化核酸探针与硫醇修饰的纳米颗粒(如金纳米颗粒)偶联,结合链霉亲和素-荧光染料,构建高灵敏度生物传感器。

    • 示例:检测细胞表面受体或病原体核酸。

  3. 药物递送与靶向治疗

    • 将生物素-硫醇试剂与含巯基的*癌药物或纳米载体偶联,通过生物素-亲和素系统靶向递送至肿瘤组织。

    • 示例:生物素化脂质体结合链霉亲和素修饰的*体,实现肿瘤特异性积累。

  4. 材料表面功能化

    • 在金纳米颗粒、量子点或水凝胶表面引入巯基后,通过生物素-硫醇试剂修饰,构建生物相容性界面。

    • 示例:开发用于细胞捕获或组织工程的智能材料。

技术参数与选择指南

参数说明
反应基团马来酰亚胺(常用)、碘乙酰胺(高选择性)、吡啶基二硫基(可逆标记)
反应条件pH 6.5–7.5,室温,避光,反应时间15分钟至2小时
溶剂兼容性水溶液(含有机溶剂如DMSO可增溶疏水性试剂)
标记效率取决于目标分子巯基数量及试剂浓度,通常1:1–1:5摩尔比可实现高效标记
储存条件-20°C避光保存,避免反复冻融

选择建议:

  • 快速标记:优先选择马来酰亚胺基团试剂,反应速率快且副反应少。

  • 高选择性:若目标分子含多个潜在反应位点,可选用碘乙酰胺基团试剂。

  • 可逆标记:需后续释放生物素时,选择吡啶基二硫基试剂(通过二硫苏糖醇DTT还原解离)。

操作流程示例(以蛋白质标记为例)

  1. 准备目标蛋白:

    • 确保蛋白含游离半胱氨酸残基,或通过化学修饰引入巯基(如使用Traut’s试剂将氨基转化为巯基)。

  2. 试剂溶解与混合:

    • 将生物素-硫醇试剂溶解于DMSO(终浓度10 mM),按1:2摩尔比加入蛋白溶液(如100 μM蛋白)。

  3. 反应与终止:

    • 室温孵育30分钟,加入过量半胱氨酸(10 mM)终止反应。

  4. 纯化与验证:

    • 通过超滤或凝胶过滤去除未反应试剂,通过SDS-PAGE或质谱验证标记效率。

Biotin-Thiol Coupling Reagent,生物素-硫醇偶联试剂的操作流程示例

包装: 瓶装

规格: 50mg / 100mg / 250mg / 500mg

物理状态: 可选固体、粉末或溶液形式

储存: 请在低温(冷藏)条件下保存,以维持活性和稳定性

产地信息: 陕西·西安

品牌与厂家简介:

供应商:西安齐岳生物科技有限公司

关于我们:

西安齐岳生物科技,我们专注于各类生物科技专用维生素的研发与生产,凭借先进的工艺和专业的团队,打造出良好产品。我们的主打产品丰富多样,生物素化药物及前体,为药物研发与应用提供有力支持;氨基酸类生物素化产品‌,满足特定领域的需求;生物素化多肽,在生物研究中大放异彩。我们以匠心雕琢每一克原料,让维生素化身生命科学的全能桥梁。从科研探索到产业应用,我们持续解锁生物分子的无限可能,用智慧与精工推动生命科学跃迁。

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