荧光素-聚乙二醇-生物素 FITC-PEG-BIOTIN对细胞表面的修饰作用的文献分享
FITC-BIOTIN 是由异硫氰酸荧光素(FITC)和生物素通过共价键连接而成的荧光探针。该分子保留了生物素对亲和素/链霉亲和素的高亲和力,同时具有 FITC 的典型荧光特性(激发波长约495 nm,发射约519 nm)。FITC-BIOTIN 常用于免疫荧光、细胞成像、亲和标记、ELISA 检测及微阵列技术中。其结构稳定,水溶性良好,既具靶向识别能力又具荧光示踪功能,是分子探针和纳米载体修饰的优选标记分子。
FITC-PEG-BIOTIN(荧光素-聚乙二醇-生物素)
FITC-PEG-BIOTIN 是一种三功能连接分子,由荧光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和生物素三部分组成。FITC 具备绿色荧光示踪功能(Ex/Em:495/519 nm),PEG 提供分子柔性和亲水性,可增强溶解性与稳定性,而生物素能特异性结合亲和素或链霉亲和素。此构造常用于构建荧光标记的靶向系统、生物成像、纳米载体修饰和亲和捕获等研究。适合在细胞实验、诊断检测或蛋白探针标记中使用,兼具识别与成像双重功能。
中文名称:荧光素标记聚乙二醇-生物素
英文名称:FITC-PEG-Biotin
别名:荧光生物素-PEG、FITC-PEGₙ-Biotin、FITC-PEGylated Biotin
CAS号:无固定CAS(为定制连接分子)
结构类型:FITC—PEG—Biotin(三元功能分子)
应用说明:
1. 免疫分析:FITC-PEG-Biotin可与特异性抗体结合,用于免疫分析,如酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blot)等。通过将FITC-PEG-Biotin标记的抗体与目标分子结合,可以实现对特定蛋白质或分子的定性和定量检测。
2. 免疫组织化学:FITC-PEG-Biotin可以用于免疫组织化学和免疫染色。将FITC-PEG-Biotin结合到抗体上,可以实现对组织样本中特定抗原的荧光染色。这种方法常用于研究组织中蛋白质的定位和表达情况。
3. 荧光显微镜成像:FITC-PEG-Biotin的荧光特性使其在荧光显微镜成像中具有应用。通过将FITC-PEG-Biotin与目标分子结合,可以实现对细胞或组织中特定结构或分子的可视化和定位。这种方法常用于细胞定位研究和细胞内分子相互作用的观察。
4. 荧光流式细胞术:FITC-PEG-Biotin可用于荧光流式细胞术中的细胞表面标记和检测。将FITC-PEG-Biotin结合到特定抗体上,可以用于检测细胞表面蛋白质的表达水平、细胞类型的鉴定和细胞亚群的分析等。
5. 药物传递研究:FITC-PEG-Biotin可作为药物载体或纳米粒子的表面标记。通过将FITC-PEG-Biotin结合到药物或纳米粒子上,可以实现对其在体内的分布、代谢和靶向传递等方面的研究。
在使用FITC-PEG-Biotin进行生物标志物检测和分析时,需要注意实验设计、控制反应条件和选择适当的检测方法。合理选择浓度和使用条件,以确保实验结果的准确性和可靠性。
参考文献:
来源:
https://link.springer.com/article/10.1186/s13287-023-03446-w
作者:
Yukiya Takayama, Kosuke Kusamori, Yuri Katsurada, Shu Obana, Shoko Itakura & Makiya Nishikawa
标题
表面聚乙二醇化高效递送间充质干细胞/基质细胞至受损肝脏
结论:
聚乙二醇修饰骨髓间充质干细胞表面
为了评估PEG对细胞表面的修饰作用,我们选择了FITC或Alexa488标记的PEG-生物素。FITC-PEG修饰的C3H10T1/2(FITC-PEG-C3H10T1/2)中FITC的荧光强度显著高于FITC-PEG-生物素处理的未修饰C3H10T1/1(FITC-PEG生物素 + C3H10T1/2)(图1A)。此外,共聚焦显微图像显示,FITC荧光信号定位在C3H10T1/2细胞的表面(图1B)。这些结果表明,使用ABC法用FITC-PEG-生物素成功修饰了C3H10T1/2细胞的表面。使用Alexa488 PEG-生物素评估PEG修饰的保留时间(图1C,附加文件1:图S1)。Alexa488-PEG的荧光强度在24小时内逐渐降低。孵育120小时后,其荧光强度仍保持在初始值的50%。尽管在随后的时间点在C3H10T1/2细胞内检测到某些荧光信号,但即使在第5天,这些信号仍留在细胞表面。此外,还评估了PEG修饰对C3H10T1/2细胞特性的影响。PEG修饰对C3H10T1/2细胞的存活率、增殖和分化的影响可以忽略不计(图2)。
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