TRITC-Dextran 四甲基罗丹明标记葡聚糖的制备工艺、光谱特性及生物医学研究中的应用
TRITC-Dextran 是一种将红色荧光染料 TRITC(四甲基罗丹明异硫氰酸酯)标记到天然葡聚糖上的荧光探针材料。它具有良好的水溶性、生物相容性和稳定荧光特性,广泛应用于细胞吞噬实验、血管渗透性分析、生物屏障研究、组织成像与药物释放等领域。
一、基本信息
中文名:TRITC-葡聚糖 / 四甲基罗丹明标记葡聚糖
英文名:TRITC-Dextran (Tetramethylrhodamine isothiocyanate-Dextran)
别称:四甲基罗丹明异硫氰酸酯-葡聚糖、红色荧光葡聚糖、TMR-Dextran、Rhodamine T-Dextran
结构组成:天然葡聚糖(Dextran)通过共价键连接四甲基罗丹明异硫氰酸酯(TRITC)
二、光学性质
激发波长(λ_ex):540–555 nm
发射波长(λ_em):570–590 nm
荧光颜色:鲜红色 / 橙红色
适用激光源:常用 543 nm 或 561 nm 激光,兼容 Cy3/FITC 滤片
TRITC-Dextran 与 RB-Dextran 光谱特性相近,但具有更强的荧光稳定性和更高的信噪比,适合荧光显微镜、共聚焦显微成像和流式细胞分析等实验。
三、物化属性
分子量(Dextran):常见规格包括 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等
物理形态:橙红色至粉红色粉末
溶解性:高度亲水,易溶于水、PBS、HBSS、细胞培养基等
稳定性:干燥避光储存稳定,溶液状态下需低温避光保存
连接方式:TRITC 的异硫氰酸酯基团与葡聚糖上的氨基反应形成稳定的硫脲键
四、合成方法概述
氨基修饰:将葡聚糖通过氯乙酸、乙二胺(EDA)或己二酰肼(ADH)修饰为氨基化葡聚糖;
偶联反应:TRITC 在碱性缓冲液(如 pH 8.5 碳酸盐缓冲液)中与氨基化葡聚糖反应;
纯化过程:采用透析袋或层析法去除未结合的游离染料;
干燥保存:冷冻干燥后制得橙红色粉末状产物。
五、主要应用领域
细胞吞噬与内吞实验
用于检测巨噬细胞、中性粒细胞等免疫细胞对大分子的摄取能力。
血管渗透性与组织屏障研究
TRITC-Dextran 被广泛用于脑血管屏障(BBB)、肠道屏障、肺泡屏障等研究。
体内/体外荧光成像
通过静脉注射或组织灌注,实现器官或组织荧光示踪。
药物载体释放机制模拟
作为模型大分子研究药物释放与扩散行为。
组织灌注与微循环示踪
应用于小动物模型中脑、肾、肝等组织的灌注与可视化成像。
生物凝胶/水凝胶渗透研究
被广泛用于评估凝胶材料对大分子的渗透性与屏障能力。
六、优势特点
✅ 强烈红色荧光,成像清晰
✅ 高水溶性,便于制备和使用
✅ 多分子量可选,适配多种研究需求
✅ 荧光稳定性强,适合长时成像
✅ 广泛适用于体内和体外实验
七、代表性文献与应用实例
Zlokovic, B. V. et al. TRITC-dextran permeability as a measure of BBB integrity. J. Cereb. Blood Flow Metab., 1990, 10, 678–689.
→ 研究脑血管通透性及神经退行性病变中的屏障破坏。
Galea, J. et al. Use of TRITC-dextran for endothelial permeability assay. Brain Res., 2007, 1147, 39–46.
→ 应用于原代脑微血管内皮细胞通透性分析。
Chen, J. et al. Hydrogel-based model to study TRITC-dextran diffusion and controlled release. Acta Biomater., 2014, 10, 3188–3196.
→ 以水凝胶包封 TRITC-Dextran 模拟大分子药物释放机制。
Sarin, H. et al. TRITC-dextran for monitoring of blood-brain barrier permeability in tumors. NeuroImage, 2009, 47, 45–55.
→ 肿瘤脑转移模型中血管渗漏评估。
八、使用方法与保存建议
推荐使用浓度:0.1–10 mg/mL,依据实验具体需求;
溶液保存:4°C 避光保存,不建议超过 3–5 天;
粉末保存:–20°C 干燥避光条件下保存,可稳定 1–2 年;
注意事项:避免与金属离子或强碱性物质长时间接触,避免高温;使用前可采用 0.22 μm 滤膜除菌。
总结
TRITC-Dextran 是一种高性能的红色荧光探针,将 TRITC 染料标记到葡聚糖分子上,兼具良好的水溶性、生物相容性和荧光稳定性。其在血管通透性分析、细胞吞噬实验、组织灌注成像、药物释放研究等方面应用广泛,是生物医药研究中重要的荧光示踪材料之一。
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