FITC-Pyruvate：结合糖酵解研究与流式检测的多功能试剂

一、基本概述

FITC-丙酮酸是一种通过化学方式将异硫氰酸荧光素（Fluorescein isothiocyanate, FITC）与丙酮酸（Pyruvic acid）进行共价偶联而制得的小分子荧光探针。该产品结合了丙酮酸的生物活性与FITC的荧光特性，可用于多种代谢研究、活体成像、细胞摄取实验和分子跟踪等领域。

二、化学结构与性质

英文名称：FITC-Pyruvic acid / Fluorescein isothiocyanate-pyruvate

中文名称：FITC-丙酮酸 / 荧光素标记丙酮酸

化学式：C₂₀H₁₃NO₈S（理论结构，具体取决于连接方式）

分子量：约为450–550 Da（取决于连接基团的具体构型）

溶解性：溶于DMSO、DMF、水、PBS等

吸收波长（λmax）：约495 nm

发射波长：约518–520 nm

荧光类型：绿色荧光，激发光波长常用488 nm

三、合成简述与偶联方式

FITC具有活泼的异硫氰酸基团（–N=C=S），可以与丙酮酸分子的羟基或氨基通过酰胺或硫脲键形成稳定的共价键。合成过程需在无水、弱碱性条件下进行，常用碱为碳酸氢钠或三乙胺。为了提高反应效率，反应体系应保持避光、无氧环境，以避免荧光团的降解或氧化。

四、功能特性与优势

高灵敏度检测：由于FITC具备强烈的绿色荧光信号，因此即使在低浓度下也能实现对丙酮酸的高灵敏度跟踪和定量。

可视化追踪代谢：丙酮酸是糖酵解和三羧酸循环（TCA）的关键中间产物。FITC标记后，可用于代谢通路追踪和细胞摄取研究。

兼容多种检测平台：适用于激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计等设备。

活细胞成像友好：由于FITC对生物活性影响较小，可直接用于体外细胞或体内模型。

五、应用场景举例

代谢通路示踪

利用FITC-丙酮酸作为荧光底物，研究丙酮酸在不同细胞或组织内的摄取、转运和代谢转化过程。

癌细胞能量代谢研究

癌细胞常表现出异常的丙酮酸代谢（如“Warburg效应”）。FITC-丙酮酸可用于分析肿瘤细胞中丙酮酸的摄取与利用。

药物筛选与代谢动力学

通过观察FITC-丙酮酸在体内或细胞内的分布与代谢，可以辅助评估新型代谢调控药物的效应。

多组分共标记实验

可与FITC之外的其他荧光染料（如Cy3、Cy5等）组合使用，实现多重荧光标记及成像分析。

六、储存与使用说明

保存方式：建议冻干形式储存于–20°C避光环境中，避免湿气和光照引起荧光团降解。

溶液稳定性：溶于DMSO或PBS后的溶液应避光、短期使用，冷藏可稳定保存数天。

使用浓度：常用工作浓度为1–100 μM，具体浓度需根据实验体系优化。

七、订购信息参考

产品名称 纯度 包装规格 推荐用途

FITC-丙酮酸（试剂级） ≥95%（HPLC） 1 mg / 5 mg 细胞摄取分析

FITC-Pyruvic acid（纯品） ≥98%（MS+NMR） 10 mg / 20 mg 荧光成像/代谢示踪

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八、注意事项

FITC对pH值敏感，在强酸或强碱条件下容易发生荧光淬灭或结构破坏，实验缓冲液应控制在pH 7.0–8.0范围内。

使用过程中需严格避光，建议采用琥珀色管或锡纸包裹。

若用于活体成像，应提前进行毒理性和摄取验证。

九、结语

FITC-丙酮酸是一个结构精巧、功能明确的荧光标记小分子工具。它不仅在基础代谢研究中提供可视化手段，还能在肿瘤学、药理学、营养学等多个领域发挥重要作用。随着代谢成像技术的发展，该类荧光代谢物分子的应用将越来越广泛。

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