cas:510758-19-7,FAM alkyne 5-isomer的合成过程研究
FAMalkyne(5-isomer)是荧光标记用的炔基荧光素探针,基于5-异构体荧光素结构(5-carboxyfluorescein,FAM),其炔基官能团可与叠氮分子进行点击反应(CuAAC),常用于DNA、RNA、蛋白或纳米材料的荧光标记。
合成过程研究通常分以下几个步骤:
5-FAM酸合成
荧光素核心分子通过区域选择性定位羧基于第5位形成5-carboxyfluorescein,这是FAM炔基修饰的关键起始物。需控制异构体分离,确保产物为5位羧酸单一异构体。
FAM炔基连接
通过DCC/NHS或EDC/NHS体系激活FAM的羧基,形成NHS酯中间体(FAM-NHS),继而与炔基胺(如propargylamine)反应生成炔基-FAM。该步骤对反应条件敏感,尤其需控制水分与pH,以避免染料降解。
区域选择与异构体控制
由于FAM可形成6-或5-位羧酸异构体,必须采用高分辨色谱(如HPLC)分离与确认,确保为5-isomer,因其在生物标记中具有更佳的空间位向与化学反应兼容性。
纯化策略
FAM类分子极具荧光性和高极性,一般采用反相HPLC进行纯化(C18柱,乙腈/水体系,带酸性缓冲)。UV与荧光检测共同监控峰型。
表征方法
UV-Vis和荧光光谱确认发光性能;
NMR确认炔基引入;
质谱确认分子量(M+H⁺≈437–460);
IR确认炔基伸缩振动(≈2100cm⁻¹)。
英文名称: FAM alkyne, 5-isomer
中文名称: FAM ALKYNE, 5-ISOMER
MF: C24H15NO6
MW: 413.38
CAS: 510758-19-7
结构式
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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