CY5-Sericin,CY5-丝胶蛋白的合成及纯化过程
CY5-Sericin 是以近红外荧光染料 CY5 标记丝胶蛋白(Sericin)得到的荧光生物材料,用于药物递送、细胞示踪、组织工程支架成像等。丝胶蛋白是蚕丝蛋白中的亲水成分,分子量分布广(20–400 kDa),富含羧基与氨基等活性基团,具良好的生物相容性与成膜性。
CY5 标记的过程以 CY5-NHS 酯为反应物,专一性地与 Sericin 分子中的伯胺基(来自赖氨酸)发生亲核反应形成酰胺键。
合成步骤:
丝胶蛋白溶液准备:将脱胶后的丝胶蛋白溶于 pH 8.5 的碳酸盐缓冲液,浓度一般控制在1–5 mg/mL,并进行滤膜除杂。
CY5-NHS 溶液制备:染料以 DMSO 或 DMF 溶解,并避光处理;控制加样比例为 CY5-NHS : Sericin(按氨基数估算)≈ 3 : 1,以避免过度标记。
偶联反应:在室温避光条件下反应2小时,充分搅拌,确保染料均匀分布。
纯化步骤:利用透析(MWCO 3–10 kDa)去除游离染料,或通过 Sephadex G-50 层析完成大分子与小分子的分离;在低温、避光条件下操作,以防止荧光团降解。
纯度与标记度分析:使用 UV-Vis 测定 280 nm(蛋白)与 646 nm(CY5)双吸收峰,计算 CY5/Sericin 的摩尔标记比;同时通过 SDS-PAGE、质谱或 SEC-HPLC 分析蛋白纯度及标记后均一性。
产品名称:CY5-Sericin,CY5-丝胶蛋白
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应各种荧光染料,包括CY系列、FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI细胞膜染料等等,提供各种荧光(CY系列、FITC、香豆素、罗丹明等)荧光染料标记的定制服务
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