CY5-LDH,CY5标记乳酸脱氢酶的化学反应原理
CY5-LDH 是通过将近红外荧光染料 Cyanine5(CY5)标记到乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase, LDH)分子上所得到的荧光蛋白复合物,用于活性酶的追踪、荧光成像及生物检测。LDH 是一种关键的胞内代谢酶,催化乳酸与丙酮酸之间的可逆转化,在细胞能量代谢和癌细胞糖酵解中发挥重要作用。将其标记CY5,有助于在体外或体内条件下研究其定位、活性变化及与抑制剂的相互作用。
CY5 标记 LDH 的化学反应原理主要基于 CY5 上的活性酯官能团(如 CY5-NHS 酯)与蛋白质表面可接近的伯胺基团(主要来自赖氨酸残基或N端氨基)之间的酰胺键形成反应。该反应原理简述如下:
NHS酯活化:CY5-NHS酯在有机溶剂中稳定,在pH 7.5~8.5的缓冲液中极易与胺基发生亲核取代反应;
共价修饰:反应过程中,蛋白质表面的氨基攻击NHS酯的羧基碳,NHS离去后形成稳定的共价酰胺键;
温和条件:整个过程通常在4°C~25°C、避光条件下进行,以防止荧光团光漂白或蛋白质变性;
标记控制:反应物比例、pH值与时间影响标记密度,过量染料可能导致蛋白活性降低,因此需通过SDS-PAGE或UV-Vis光谱确定标记程度。
标记后的 CY5-LDH 通常保留部分或全部酶活性,可用于荧光共聚焦显微镜、体外平台或细胞内酶动力学研究。由于 CY5 发射波长位于远红区(650–670 nm),具备低自发荧光干扰和高组织穿透力,
产品名称:CY5-LDH,CY5标记乳酸脱氢酶
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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