FITC-Lactic acid,荧光素异硫氰酸酯FITC标记乳酸的合成步骤概述
FITC-Lactic acid 是将荧光素异硫氰酸酯(FITC)与乳酸(Lactic acid)或乳酸衍生物通过化学反应偶联得到的荧光小分子探针,适用于代谢成像、乳酸通道活性检测以及细胞能量状态研究。由于乳酸分子本身缺乏直接与异硫氰酸酯反应的伯胺基,因此需要引入氨基功能团或采用间接标记策略。
以下是常用的合成步骤:
1. 中间体设计
使用 乳酸-乙二胺衍生物(Lactic acid–ethylenediamine) 或 乳酸连接PEG-amine 作为偶联前体,在乳酸羧基与氨基之间形成酰胺键,使乳酸具有可反应的伯胺基团。
2. FITC偶联反应
将合成好的乳酸胺溶于碳酸氢钠缓冲液(pH 8.5~9.0),加入适量FITC(溶于DMSO或DMF),在避光条件下室温反应4–12小时;
FITC的异硫氰酸基团与胺基发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键。
3. 纯化步骤
反应后用透析袋(MWCO 1~3 kDa)去除游离FITC;
或采用C18反相色谱柱,以梯度乙腈-水洗脱,收集荧光产物;
干燥后得到黄绿色固体或溶液形式的 FITC-Lactic acid。
4. 表征方法
UV-Vis(吸收波长495 nm)和荧光光谱(发射519 nm)确认荧光性质;
LC-MS确认产物分子量,进一步验证连接的乳酸结构;
若连接PEG,则可用^1H-NMR确认氢谱中乳酸和PEG链段的化学位移。
该产物具有良好的水溶性和荧光特性,适用于代谢通量检测、乳酸释放分析、肿瘤细胞糖酵解活性的成像研究等生物医学领域。
产品名称:FITC-Lactic acid,荧光素异硫氰酸酯FITC标记乳酸
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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