CY5-MUCIN，近红外荧光染料CY5共价标记黏蛋白的反应步骤

CY5-MUCIN 是将近红外荧光染料 Cyanine5 (CY5) 共价标记于黏蛋白（Mucin）分子上的荧光复合物，常用于细胞表面黏蛋白的定位、肿瘤及黏膜病理学研究。以下为CY5-MUCIN的合成反应步骤详述：

原料准备

黏蛋白（Mucin）：取高纯度商业购得的黏蛋白溶液，通常为水溶性，含有大量羟基和氨基残基。

CY5-NHS酯：活性Cyanine5染料，带有N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性基团，适合与蛋白质的赖氨酸残基氨基反应。

缓冲液制备

选用pH 8.0-8.5的碳酸盐缓冲液，保证氨基的反应活性同时稳定蛋白结构，抑制非特异性降解。

偶联反应

将黏蛋白溶液与CY5-NHS酯按照适当摩尔比（通常5:1至10:1）混合，缓慢搅拌反应体系。反应一般在室温下避光条件下进行2-4小时，确保NHS酯与蛋白质的赖氨酸氨基充分形成酰胺键。

反应终止

加入过量甘氨酸或Tris缓冲液以封闭未反应的NHS酯，终止偶联反应，防止后续非特异性结合。

纯化步骤

使用透析法或凝胶过滤柱（如Sephadex G-25）去除未结合的游离染料及小分子杂质。透析时间通常为24小时，换液数次，确保纯净。

浓缩与储存

纯化后的CY5-MUCIN浓缩至所需浓度，储存在避光、低温（4℃）条件下，避免荧光团光漂白和蛋白质降解。

表征确认

通过紫外-可见光光谱及荧光光谱检测标记效率，蛋白质浓度由BCA法或紫外吸光度法测定。

产品名称：CY5-MUCIN

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.05.23