Cy3-TCO,花菁染料CY3反式环辛烯的合成步骤概述
Cy3-TCO是一种结合了花菁染料CY3与反式环辛烯(TCO)基团的功能性荧光标记物。TCO作为一种高度活泼的炔烯类生物正交反应配体,应用于活细胞标记和生物正交点击化学。
合成步骤概述:
CY3-NHS酯的制备或采购
Cy3染料通常以NHS酯形式提供,作为活性酯,便于与胺基官能团反应。
TCO-胺的准备
反式环辛烯基胺(TCO-NH2)作为氨基供体,可通过专门合成或购买得到。
偶联反应
在pH约8.0的缓冲体系(如碳酸盐缓冲液)中,将CY3-NHS酯与TCO-NH2按一定摩尔比混合。
TCO-NH2的氨基亲核攻击CY3-NHS酯的酯碳,释放NHS,形成稳定的酰胺键。
反应在室温下持续数小时,保证充分偶联。
反应监控
通过高效液相色谱(HPLC)和质谱(MS)检测反应进度,确认产物形成。
纯化步骤
反应完成后,采用半制备HPLC分离纯化Cy3-TCO,去除未反应起始物和副产物,得到高纯度标记物。
结构确认
通过质谱和核磁共振(NMR)确认Cy3-TCO的结构完整性。
储存条件
纯化后的Cy3-TCO一般储存在-20℃避光干燥处,保持其活性和荧光性质。
产品名称:Cy3-TCO,花菁染料CY3反式环辛烯
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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