CY3-Collagen,花菁染料CY3标记胶原蛋白的制备方法
CY3-Collagen是将荧光染料Cy3共价标记于胶原蛋白分子上的复合物,用于研究胶原蛋白的分布、代谢以及与细胞外基质的相互作用。胶原蛋白是结构蛋白质家族的主要成员,具有丰富的赖氨酸和羟赖氨酸残基,适合通过化学方法实现荧光标记。
制备方法:
材料准备
纯化胶原蛋白(一般来源于牛皮、猪皮等),常用I型胶原蛋白。
Cy3-NHS酯或其他活性Cy3衍生物。
缓冲液(通常选用pH 7.4的PBS或碳酸氢盐缓冲液),保证蛋白质稳定性和标记反应条件。
溶解胶原蛋白
胶原蛋白在缓冲液中缓慢溶解,保持低温避免蛋白质变性,调节浓度至适合反应。
标记反应
将Cy3-NHS酯溶于少量有机溶剂(如DMSO),缓慢加入胶原蛋白溶液中。NHS酯与胶原蛋白上的自由氨基(主要来自赖氨酸残基)反应,形成稳定的酰胺键,实现共价连接。反应时间一般为1-2小时,温度控制在室温或4℃以保护蛋白活性。
反应终止及纯化
反应结束后,通过透析、凝胶过滤或离心过滤等方法去除未反应的游离染料及小分子杂质,获得纯净的CY3-Collagen标记物。
储存
纯化后的标记胶原蛋白通常保存在低温避光环境中,使用含有防腐剂的缓冲液维持其稳定性。
该方法能有效保持胶原蛋白的三螺旋结构和生物功能,同时获得高亮度的荧光信号,适合细胞培养、组织成像和生物力学研究。
产品名称:CY3-Collagen,花菁染料CY3标记胶原蛋白
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.05.23