CY3-Zymosan A,CY3标记酵母聚糖A的反应步骤
CY3-Zymosan A的制备基于花菁染料CY3与酵母聚糖A颗粒表面的共价偶联,通常需要先对Zymosan A进行化学改性以引入可反应的氨基位点,随后再与CY3-NHS酯进行酰胺化反应。该过程主要包括以下几个关键步骤:
1. Zymosan A预处理与功能化:
由于Zymosan A颗粒的表面以羟基为主,缺乏胺基等反应活性基团,无法直接与CY3-NHS酯反应。为此,需先对其进行表面修饰,常见方法包括通过1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺(EDC)与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化羧基,并偶联多胺类化合物如乙二胺或聚乙烯亚胺(PEI)以引入伯胺基团。
2. CY3染料的活化与偶联反应:
使用商业可得的CY3-NHS酯作为荧光标记试剂,溶于DMSO或DMF中备用。将带有氨基修饰的Zymosan A悬浮在pH 7.4的PBS或碳酸缓冲液中,然后缓慢加入CY3-NHS酯溶液。反应一般在避光条件下温和搅拌2–4小时进行,确保反应充分而染料不被水解。
3. 后处理与纯化:
反应结束后,通过多次离心和洗涤步骤去除未结合的染料分子。一般用PBS或去离子水洗涤3–5次,直至上清无明显红色荧光为止。终所得的CY3-Zymosan A悬液可立即使用,或冻干保存于避光干燥环境中。
产品名称:CY3-Zymosan A,CY3标记酵母聚糖A
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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