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FITC-Gluconic acid,荧光素标记葡萄糖酸的反应步骤
发布时间:2025-06-23     作者:axc   分享到:

FITC-Gluconic acid,荧光素标记葡萄糖酸的反应步骤

FITC-Gluconic acid 的合成主要依赖于 FITC(Fluorescein isothiocyanate)与葡萄糖酸胺基衍生物之间的亲核取代反应,生成稳定的荧光硫脲键结构。以下是合成流程的主要步骤:

步:葡萄糖酸胺基化修饰

由于葡萄糖酸本身不含胺基,需通过引入氨基基团实现染料偶联。常用方法为:

将葡萄糖酸溶于 MES 缓冲液;

使用 EDC/NHS 激活羧基;

添加乙二胺反应生成 Gluconic acid–NH₂;

用 NaBH₄ 还原 Schiff 碱,形成稳定胺基。

第二步:FITC 活性处理

FITC 为异硫氰酸酯类染料,无需额外激活,可直接使用。需预先溶于无水 DMSO 或 DMF 中,并避光保存。

第三步:偶联反应

将 Gluconic acid–NH₂ 溶解于 0.1 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 8.5)中,缓慢加入 FITC 溶液,避光搅拌反应 12–18 小时。反应温度建议维持在 4–25 °C 范围,避免染料降解。

第四步:纯化处理

反应结束后采用以下方法去除未反应染料与副产物:

透析法(MWCO 1–3 kDa,缓冲液换液3次以上);

或 Sephadex G-25 柱层析法。

第五步:结构表征

使用 UV-Vis 光谱确认 λmax ≈ 495 nm;

荧光光谱验证发射峰 λem ≈ 520 nm;

可结合 HPLC 与质谱分析确认偶联率及纯度。

合成完成的 FITC-Gluconic acid 为黄色至黄绿色粉末或溶液,水溶性好、荧光强,可冷冻干燥储存于避光条件下(–20 °C)。该探针适用于糖类受体研究、葡萄糖代谢成像、靶向药物释放系统以及多糖衍生物功能化。

产品名称:FITC-Gluconic acid,荧光素标记葡萄糖酸

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

FITC-Gluconic acid

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