文献：VHH-Mediated targeting of osteoarthritic Synovium by synthesizing functional lipid nanoparticles using post-insertion

文献链接：http://essay.utwente.nl/102560/

本文主要研究功能性LNPs的合成。测试了脂质插入后的方法，因此，脂质首先与功能性生物配体结合。结合后，将功能性脂质插入LNP中，为此，测试了三种脂质摩尔比：0.1、0.2和0.3%。本报告中的生物配体首先是一种荧光Cy3染料，用于确认结合，后来是一种靶向细胞上IL-1R受体的VHH。对两个反应性基团DBCO和马来酰亚胺以及两个PEG间隔长度2000和5000 Da进行了脂质测试。

在人字形结构的微流控芯片的帮助下，以mCherry和tRNA为药物成功合成了LNPs。通过荧光测量分析脂质（DSPE-PEG-Mal/DBCO）与Cy3-PEG-SH/叠氮-PEG2000-Cy3染料的结合，并确认反应基团和PEG间隔物。

与2000Da的PEG间隔物相比，5000Da PEG间隔物实现了更高的共轭。通过SDS-page定量证实了DSPE-PEG-Mal与VHH与5000Da PEG间隔物的结合。插入DSPE-PEG-Mal-Cy3和DSPEPEG Mal VHH后显示出不确定的结果。

通过荧光测量分析，两种PEG间隔物的DSPE-PEG-DBCO-Cy3插入后均成功。DSPE-PEG-DBCO-Cy3的摩尔比越高，荧光信号越高，因此更多的脂质被插入到LNPs中。

含有5000 Da PEG的DSPE-PEG-DBCO-Cy3具有比2000 Da PEG更高的荧光，因此更多的脂质被插入到LNPs中。所有插入后的LNP都使用DLS进行尺寸和PDI测量。插入后导致LNP的尺寸和PDI更高，更高的摩尔比不影响尺寸和PDL。

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