AF647-Cephaeline,AF647标记吐根酚碱的反应机制,荧光染料标记药物
AF647-Cephaeline是一种通过共价偶联Alexa Fluor 647染料与吐根酚碱(Cephaeline)制备的标记物。吐根酚碱是一类具有复杂吲哚生物碱骨架的产物,含有多个活性氨基和羟基官能团。
其反应机制主要依赖于Alexa Fluor 647的N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯)活性基团与吐根酚碱分子上的游离氨基发生亲核攻击,形成稳定的酰胺键连接。此过程通常在轻度碱性缓冲液(pH 7.5-8.5)条件下进行,以保证氨基的活性和染料的稳定性。
反应步骤中,吐根酚碱的氨基作为亲核试剂,攻击NHS酯,释放NHS,完成偶联。该反应速度快,产率高,且在温和条件下避免染料和碱基结构的破坏。
偶联后,AF647染料的荧光特性得以保持,赋予复合物强烈的远红外发射信号,便于分子追踪与定位。反应机制保证了连接的共价稳定性,避免了非共价结合导致的脱标或信号衰减。
此类标记物适用于化学研究、分子识别和递送系统构建,结合了碱类分子的特异结构和荧光探针的高灵敏度。
AF647-Cephaeline(AF647标记吐根酚碱)制备方法
AF647-Cephaeline的制备通常利用吐根酚碱分子上的仲胺结构,通过与AF647-NHS ester发生酰胺化反应构建共价连接。首先,将Cephaeline溶解在少量无水DMSO或乙腈中,并使用弱碱性缓冲液(如0.1 M NaHCO₃,pH 8.3)调节反应体系的pH值。随后,将AF647-NHS染料在等体积DMSO中溶解后缓慢滴加至Cephaeline溶液中,保持充分搅拌并避光反应。
反应条件控制在室温下持续2–6小时,随后通过透析法或高效液相色谱(HPLC)对产物进行分离纯化,去除未反应染料和中间副产物。终的AF647-Cephaeline可用LC-MS或MALDI-TOF确认分子量,同时用UV-Vis和荧光光谱分析确认荧光性能。成品储存于避光条件下于4°C或−20°C冷冻保存。
产品名称:AF647-Cephaeline,AF647标记吐根酚碱
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应Alexa Fluor系列荧光分子染料,AF594(Alexa Fluor 594)是一种红色荧光染料,AF594常以活性酯(如NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等形式出现,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。其用于构建荧光探针、生物传感器、药物递送系统标记、表面功能化及动态过程追踪等科研方向。
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