产品名称:叔丁基保护氨基PEG羟基,Boc-NH-PEG-OH的实验方案
关键应用场景与实验方案
1. 多步合成:氨基的选择性功能化
应用场景:
在复杂分子(如蛋白质、多肽、核酸)的PEG化修饰中,需先保护氨基以避免副反应,后续脱保护后引入目标基团。
实验步骤:
Boc脱保护:
将Boc-NH-PEG-OH溶于TFA(10% v/v in DCM),室温搅拌1小时。
旋转蒸发去除TFA,残留物用甲苯共沸干燥,得到NH₂-PEG-OH。
氨基偶联:
将NH₂-PEG-OH与NHS酯活化分子(如NHS-PEG-COOH)在pH 8.0的PBS中反应,生成NH₂-PEG-NH-CO-PEG-COOH。
羟基活化:
剩余羟基可转化为活性酯(如NHS酯)或炔烃,用于后续点击化学标记。
2. 生物分子修饰:蛋白质PEG化
应用场景:
延长蛋白质体内半衰期,减少免疫原性,同时保留生物活性。
实验步骤:
Boc脱保护:
同上,得到NH₂-PEG-OH。
羟基活化:
将NH₂-PEG-OH与NHS、DCC在DMF中反应,生成NH₂-PEG-O-CO-NHS(活性酯)。
蛋白质偶联:
将活性酯与羧酸化蛋白(如BSA-COOH)在pH 8.0的PBS中反应,生成BSA-PEG-NH₂。
纯化与表征:
通过超滤或透析去除未反应试剂,通过SDS-PAGE和质谱验证偶联效率。
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