CY7-SA（链霉亲和素）偶联物制备方法

中文名称：CY7标记链霉亲和素
英文名称：Cy7-Streptavidin Conjugate
别名：Cy7-SA偶联物、近红外染料标记链霉亲和素、赛妥染料标记链霉亲和素

供应商：西安齐岳生物科技有限公司

用途：科研

一、原料与基本原理：

链霉亲和素（Streptavidin, SA）：一种四聚体蛋白，具有很强的与生物素结合能力，是常用的生物素化检测系统核心分子；

Cy7-NHS（活性酯型近红外荧光染料）：N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯形式的Cy7能高效与蛋白质中的赖氨酸残基反应，形成稳定的酰胺键；

缓冲液：如PBS（pH 7.4）或0.1M碳酸盐缓冲液（pH 8.3）可提供稳定环境。

二、合成步骤：

1. 材料准备

   将SA蛋白溶于PBS缓冲液中，浓度一般控制在1–2 mg/mL；

Cy7-NHS染料通常以DMSO为溶剂溶解，浓度约为1–10 mM备用。

2. 共轭反应

   按摩尔比约1:5~1:10（SA : Cy7-NHS）缓慢将染料溶液滴加至蛋白溶液中；

反应体系在避光条件下，于室温孵育0.5–2小时，轻轻搅拌促进反应；

为防止非特异性反应，pH维持在7.5–8.5，避免高温或极端pH。

3. 纯化处理

   反应结束后，使用透析袋（10 kDa）透析去除未结合染料；

或使用凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）进行纯化，收集荧光峰对应的蛋白组分。

4. 质量控制与储存

   测定蛋白浓度（280 nm）和荧光吸收峰（Cy7：约750 nm）确认偶联效率；

最终产物避光分装于pH 7.4 PBS中，-20°C避光保存。

三、应用与优势：

• 应用：常用于近红外荧光成像、生物素标记分子检测、免疫组化、电泳显色、蛋白质追踪和体内荧光成像等；

• 优势：

  发射波长约775 nm，组织穿透力强；

  与生物素高亲和结合，特异性强；

  可与荧光素、Cy3等染料搭配用于多重检测。

关于我们：

西安齐岳生物提供的荧光标记服务支持糖化学、蛋白质、多肽、抗体、核酸及纳米材料等多种生物分子的荧光化修饰。可提供多种荧光探针（如FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor系列、ICG等），根据应用场景（流式细胞、共聚焦、活体成像等）选择合适波长及标记方式。服务包含标记反应、纯化、标记率评估及质量验证，确保分子活性和信号强度。适用于细胞追踪、分子成像、靶向验证等研究，亦可提供定制荧光强度、pH响应或近红外探针功能化服务。

以上资料由小编zhn提供，仅用于科研

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