AF647标记β-谷甾醇,AF647-β-Sitosterol的合成步骤
AF647-β-Sitosterol是通过Alexa Fluor 647染料共价偶联β-谷甾醇的荧光标记化合物。β-谷甾醇为植物甾醇,结构上含有四环甾体骨架和侧链,分子含有唯一的3β-羟基作为主要偶联位点。
合成步骤如下:首先将β-谷甾醇溶解于无水有机溶剂(如氯仿或四氢呋喃),对羟基进行适当活化处理,如转化为氨基衍生物或引入反应性官能团。随后加入AF647-NHS酯,促使活化位点与染料活性酯发生亲核反应,形成稳定的酯键。
反应通常在室温下进行数小时,反应体系需保持干燥以防水解。完成后,通过柱层析或高效液相色谱进行纯化,去除游离染料和未反应的底物。
终产物结合了β-谷甾醇的生物膜亲和性和AF647的远红外荧光特性,适用于膜模型研究和分子追踪。
AF647-β-Sitosterol(AF647标记β-谷甾醇)制备方法
β-谷甾醇(β-Sitosterol)为疏水甾体化合物,具有一个羟基作为反应位点。为实现AF647标记,首先将其羟基与琥珀酰亚胺(NHS)或马来酰亚胺功能团连接的胺型中介分子(如NH₂-PEG-NHS)进行酯化,生成胺基衍生物。随后将该衍生物与AF647-NHS溶液共混,在有机碱DIPEA辅助下于室温避光反应2~3小时。反应结束后经HPLC或硅胶柱纯化,终得到AF647-β-Sitosterol,可用于膜成分示踪或脂质代谢研究。
产品名称:AF647标记β-谷甾醇,AF647-β-Sitosterol
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应Alexa Fluor系列荧光分子染料,AF594(Alexa Fluor 594)是一种红色荧光染料,AF594常以活性酯(如NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等形式出现,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。其用于构建荧光探针、生物传感器、药物递送系统标记、表面功能化及动态过程追踪等科研方向。
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