文献：SREKA-targeted liposomes for highly metastatic breast cancer therapy

文献链接：https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/10717544.2023.2174210#abstract

作者：Balázs Vári,Levente Dókus,Adina Borbély,Anikó Gaál,Diána Vári-Mező,Ivan Ranđelović

通过脂质膜水合和挤出法制备了含CREKA/SREKA肽的脂质体。将DSPE-PEG-CREKA（5mg/mL）和DSPE-PEG-SREKA（10mg/mL）的乙腈储备溶液加入到含有溶解在氯仿中的HSPC、胆固醇、DSPE-PEG2000的脂质混合物中，并在N2气流下干燥成薄脂质膜，然后在真空下孵育过夜以去除残留溶剂。

接下来，0.25 M、 使用pH=6.5的硫酸铵溶液使脂质膜水合，使总脂质浓度达到16 mg/mL（9.6mg/mL HSPC，3.2 mg/mL胆固醇和3.2 mg/mL DSPE-PEG2000或肽修饰的PEG脂质。

然后将混合物保持在60 30°C 使用磁热板（IKA RET control visc，IKA Werke GmbH&Co.KG，Staufen，德国）。将得到的多层囊泡（MLV）悬浮液进行五次冻融循环（每次5分钟，在液氮中冷冻，在60℃下解冻） 在60℃下挤压10次之前 °C至100 nm聚碳酸酯膜过滤器（Whatman，Springfield Mill，UK）。使用PD-10柱（Sephadex G-25，Cytiva，Little Chalfont，England）将缓冲液改为l-组氨酸/蔗糖缓冲液（10mM/10%，pH=6.5）。

接下来，将柔红霉素（7 mg/mL，0.9%NaCl溶液）加入脂质体（3.5 mL脂质体样品+1.5 mL 7 mg/mL柔红霉素溶液），然后孵育1小时 h 60时 °C.根据制造商的说明，使用PD-10或G-25 midiTrap脱盐柱去除未包封的柔红霉素药物。还用与Lipo-25S样品相对应的脂质组合物制备了无药物脂质体制剂，以下称为E-Lipo-25S。

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