文献：通过插入后合成功能性脂质纳米颗粒，VHH 介导骨关节炎滑膜靶向*

链接：http://essay.utwente.nl/102560/

作者：Mourik, CM van (2024) 

摘要：

骨关节炎是*常见的关节炎类型，也是全球范围内致残的主要原因之一。该疾病的特征是滑膜炎，即关节滑膜的炎症。发炎的滑膜会分泌分解代谢和促炎产物，导致M1（促炎）和M2（*炎）巨噬细胞之间失衡。这种失衡*终导致关节软骨退化。骨关节炎是一种慢性疾病，目前尚无有效的*方法。一种潜在的*选择是使用靶向药物递送。通过这种方式，药物可以被运送到特定的靶细胞。使用siRNA作为药物已被证明是有效的。这些药物会抑制M1或激活M2巨噬细胞。为了运输和封装药物，可以使用可电离的脂质纳米粒（LNP）。

LNP在体内生理pH下呈中性，但当细胞内pH值降低时，LNP会变成阳离子。这会导致LNP分解并释放其内容物。为了靶向特定类型的巨噬细胞，LNP 需要包被生物配体。VHH 在这方面显示出良好的应用前景，因为它们是分子量约为 15 kDa 的小*体片段，具有与单克隆*体相同的结合亲和力。本论文重点研究了功能性 LNP 的合成。测试了脂质后插入法，首先将脂质与功能性生物配体偶联。偶联后，将功能性脂质插入 LNP，为此测试了三种脂质摩尔比：0.1%、0.2% 和 0.3%。本报告中的生物配体首先是用于确认偶联的荧光 Cy3 染料，然后是靶向细胞上 IL-1R 受体的 VHH。

测试了两种反应基团（DBCO 和马来酰亚胺）以及两种 PEG 间隔物长度（2000 和 5000 Da）。利用人字形结构微流控芯片，成功合成了以mCherry和tRNA为药物的LNPs。通过荧光测量分析了脂质体（DSPE-PEG-Mal/DBCO）与Cy3-PEG-SH/叠氮化物-PEG2000-Cy3染料的结合情况，并确认了反应基团和PEG间隔臂的结合情况。5000 Da PEG间隔臂的结合率高于2000 Da PEG间隔臂。

SDS-page定量分析证实了DSPE-PEG-Mal与VHH之间通过5000 Da PEG间隔臂的结合。DSPE-PEG-Mal-Cy3和DSPEPEG-Mal-VHH的后插入结果不确定。荧光测量分析显示，DSPE-PEG-DBCO-Cy3 在两种 PEG 间隔物上的后插入均成功。DSPE-PEG-DBCO-Cy3 的摩尔比越高，荧光信号越强，因此有更多的脂质插入到 LNP 中。含有 5000 Da PEG 的 DSPE-PEG-DBCO-Cy3 的荧光强度高于含有 2000 Da PEG 的 DSPE-PEG-DBCO-Cy3，因此有更多的脂质插入到 LNP 中。所有后插入的 LNP 均使用 DLS 测量其尺寸和 PDI。后插入导致 LNP 的尺寸和 PDI 增大，较高的摩尔比不会影响尺寸和PDI。

西安齐岳生物提供相关产品：

DSPE-PEG-c(RGDfk)

DSPE-PEG-c(RGDfK)-FITC

DSPE-PEG-c(RGDfK)-Biotin

DSPE-PEG-c(RGDfc)

DSPE-PEG-GE11

DSPE-PEG-PTP

DSPE-PEG-T7(HAIYPRH)

DSPE-PEG-TH

DSPE-PEG-YIGSR

DSPE-PEG-NGR

以上文章内容来源各类期刊或文献，如有侵权请联系我们删除！