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荧光酪酰胺缀合物,iFluor 594 Styramide
发布时间:2025-07-02     作者:zyl   分享到:

iFluor 594 Styramide 是一款基于 iFluor 594 荧光染料的活性衍生物,含有酪酰胺(Tyramide)功能基团,专为高灵敏度的生物标记和信号放大设计。其结合了 iFluor 594 染料优异的光学性能和酪酰胺的高效共价偶联能力,广泛应用于免疫荧光、原位杂交及多重荧光成像等领域。

化学结构与基本特性

染料核心 iFluor 594

iFluor 594 是一种光谱性能优异的氰ine类荧光染料,激发波长约为 590 nm,发射波长约为 610 nm,属于橙红色荧光区。该波段兼顾了高亮度和低背景,使其适用于细胞、组织等多种生物样本的荧光检测。

酪酰胺(Styramide)功能基团

酪酰胺结构使染料能够在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下,通过过氧化氢活化形成自由基,与邻近蛋白质中的酪氨酸残基发生共价结合。这种共价沉积机制使染料牢固附着于靶标区域,大幅增强检测信号,减少染料扩散,*大提高了检测灵敏度和空间分辨率。

溶解性和稳定性

iFluor 594 Styramide 具有良好的水溶性和缓冲兼容性,易于操作。染料本身具有高光稳定性,在激光照射或长时间成像条件下荧光信号衰减缓慢,适合高强度或长时程的成像实验。

主要应用领域

1. 信号放大技术(Tyramide Signal Amplification, TSA)

iFluor 594 Styramide 是 TSA 技术的核心试剂之一。在该技术中:

目标分子上的 HRP 催化过氧化氢分解产生活性自由基

iFluor 594 Styramide 被活化形成高反应性中间体

该中间体快速与靶标附近蛋白质中的酪氨酸共价结合

结果是靶标区域染料大量沉积,*大提升荧光信号强度,特别适用于低表达蛋白或稀有靶点的检测。

2. 免疫荧光染色(IF)

适合检测细胞或组织切片中的蛋白质分布。iFluor 594 的光谱位于黄橙色区,能有效避免生物组织的自发荧光干扰,呈现明亮清晰的信号。

3. 原位杂交(FISH/ISH)

可用于标记核酸探针,实现基因定位与表达分析,保证信号强度和空间分辨率,支持多重荧光分析。

4. 多重荧光成像

由于 iFluor 594 发射光谱与其他常用染料(如 iFluor 488、iFluor 647 等)分离良好,方便在同一样本中进行多靶点标记和检测。

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