文献：Recapitulating the Lateral Organization of Membrane Receptors at the Nanoscale

作者：Seyed R. Tabaei*Marcos Fernandez-VillamarinSetareh VafaeiLorcan RooneyPaula M. Mendes

文献链接：https://pubs.acs.org/doi/full/10.1021/acsnano.3c00683

我们合成了各种功能性的二乙炔单体，以制备可光聚合的脂质体，作为糖在脂质膜表面分子印迹的平台。该受体结合了一个由四个亲水性低聚（乙二醇）单元组成的间隔链，使BA更容易在膜界面上与糖接触。

PCDA-PEG-BA单体是通过N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）PCDA衍生物与二氨基PEG直接反应，然后使用N-乙基-N′-（3-（二甲氨基）丙基）碳二亚胺（EDC）和NHS将产物与3-羧基苯基硼酸反应而获得的。或者，也合成了一种不含PEG的受体，以测试接头效应。PCDA-BA是通过EDC直接将3-氨基苯基硼酸偶联到PCDA分子上而获得的。

最后，使用不含BA的单体作为可聚合基质脂质，与BA官能化单体结合构建脂质体。PCDA-PEG也是通过NHS PCDA衍生物与（2-（2-甲氧基乙氧基）乙基）胺之间的直接反应获得的。

通过在高于PCDAs相变温度（Tm）的80°C下超声处理制备所需组成的脂质体。为了印迹，脂质体在pH 10的温度下与模板糖一起孵育1小时，然后在4°C下储存24小时。

然后用254 nm紫外光照射透明溶液。以相同的方式制备非压缩脂质体，不与模板孵育。总脂质浓度通常在0.5至2 mM之间，因为更高的浓度会导致PCDA从溶液中沉淀出来。根据脂质组成，官能化PDA脂质体的平均直径为200±59.9 nm。

表面等离子体共振（SPR）光谱用于评估糖与脂质体的结合亲和力。我们将生物素化脂质（DMPE-PEG-生物素）掺入脂质体制剂中，并通过生物素-中和素-生物素夹心连接将其固定在金表面。

为了评估糖结合，从不含脂质体的表面上减去不同浓度糖的SPR响应（图2B和C）。采用四糖水苏糖作为印迹模板。使用水苏糖和单糖果糖作为对照，研究了印迹和非印迹脂质体的结合行为。

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