文献:Exosomal Vaccine Loading T Cell Epitope Peptides of SARS-CoV-2 Induces Robust CD8+ T Cell Response in HLA-A Transgenic Mice
作者:An-Ran Shen 1, Xiao-Xiao Jin 2, Tao-Tao Tang 1, Yan Ding 2, Xiao-Tao Liu 2, Xin Zhong 1, Yan-Dan Wu 2, Xue-Lian Han 3, Guang-Yu Zhao 3, Chuan-Lai Shen 2, Lin-Li Lv 1,✉, Bi-Cheng Liu 1
文献链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9346304/
方法
HLA-A0201分子呈递的31种肽与DMPE-PEG-NHS分子偶联,与DSPE-PEG混合形成肽-PEG脂质胶束,然后与外泌体融合产生外泌体疫苗,然后使用尺寸排阻色谱纯化,并通过蛋白质印迹、液体核磁共振(NMR)测试和透射电子显微镜进行验证。
此外,将外泌体疫苗与Poly(I:C)佐剂混合,并皮下注射到HLA-A0201/DR1转基因小鼠与野生型小鼠的杂交小鼠中三次。然后,通过体外ELISPOT测定和细胞内细胞因子染色检测表位特异性T细胞反应。
结果
从FPLC的Peak 2部分纯化外泌体疫苗,并将其注射到杂交小鼠体内三次。外泌体疫苗组的IFN-γ斑点形成单位和IFN-γ+/CD8+T细胞频率分别比Poly(I:C)对照组高10-82倍和13-65倍,没有明显的器官毒性。与我们最近工作中产生的肽鸡尾酒疫苗相比,外泌体疫苗诱导的T细胞反应明显更强。
结论
携带严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型病毒T细胞表位肽的外泌体疫苗最初是在没有对肽和外泌体进行预修饰的情况下产生的,并在HLA-A转基因小鼠中引发了强烈的CD8+T细胞反应。
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