文献：线粒体靶向脂质体用于将药物递送至*线粒体

链接：https://www.mdpi.com/1999-4923/16/7/950

作者：艾塞古尔·埃克梅克奇奥卢，奥兹古尔·戈克，德夫里姆·奥兹-阿尔斯兰，梅里耶姆·塞德夫·埃尔达尔，亚瑟明·亚甘·乌祖纳，梅尔特姆·穆夫图奥卢

节选：

DSPE-PEG-TPP聚合物的合成与表征

为了制备靶向线粒体的脂质体，按先前说明的方法合成了 DSPE-PEG-TPP 聚合物偶联物 [ 16 ]。将 TPP（0.48 mmol）、NHS（0.144 mmol）和 EDCl（0.144 mmol）的混合物溶于 CDCl3（0.5 mL）中，并在黑暗条件下于室温（RT）搅拌 2 小时。然后，将 DSPE-PEG 2000 - NH2（0.036 mmol；溶于 CDCl3 ）和 TEA（0.018 mmol）加入到混合物中，并在氮气下于室温搅拌 24 小时。使用旋转蒸发仪蒸发氯仿（CDCl3 ），并将粗品溶解于 2 mL 双蒸水（ddH2O ）中。粗品溶解后立即得到浑浊溶液。将溶液在冷室中，用透析膜（MWCO：2 kDa）对1 L ddH 2 O在4 °C下透析24小时。透析过程中，每2小时更换一次ddH 2 O，共5次，并在4 °C下放置24小时。使用FreeZone 6冻干系统（Labconco，美国密苏里州堪萨斯城）将透析液冻干过夜，并通过质子核磁共振（1 H-NMR，Bruker 400 MHz NMR，德国柏林）表征DSPE-PEG-TPP聚合物偶联物的纯度。将纯的DSPE-PEG-TPP聚合物以粉末形式储存在4 °C下以备将来研究。

脂质体的制备

空脂质体和载 Dox 脂质体均通过先前描述的薄膜水化法制备 [ 16，17，18 ]，并进行以下修改：通过将胆固醇：L-α-PC：DSPE-PEG-TPP 或 PEG-PE 按 1:0.92:0.08（摩尔％）的比例混合来制备空 TPPL 和 PPL。简而言之，根据脂质体配方将所有成分溶解在 DCM 中，然后在旋转蒸发器中形成脂质膜。使用真空干燥器去除过量的 DCM。然后，用 DPBS（pH 7.4）水化干燥的脂质膜，并让其在 4 °C 下自组装过夜。将水合产物在超声波槽中超声处理 30 分钟。然后，通过0.45 μm滤膜过滤一次，再通过0.22 μm滤膜过滤两次，获得*终的脂质体制剂。为了监测体外环境下的空TPPL和PPL，采用薄膜水化法，将0.005 mol%的RhB DHPE荧光示踪染料添加到脂质体成分中，制备了RhB-TPPL和RhB-PPL。

为制备载阿霉素的 TPPL 和 PPL，将阿霉素的甲醇原液 (10 mM) 添加到与空脂质体相同的新鲜配制的脂质混合物中，*终浓度为 100 µM（DCM 溶液），然后通过上述薄膜水化法制备脂质体 。为从载阿霉素的 TPPL 和 PPL 中分离游离（未掺入）阿霉素，将制剂在 4 °C 下以 200,000× g超速离心16 小时。超速离心后，弃去上清液（其中包括未掺入/游离的阿霉素），然后用 1 mL 无菌 dH 2 O 洗涤沉淀两次。分离游离的 Dox 后，对载有 Dox 的 TPPL 和 PPL 进行表征，并使用光谱扫描多模读取器（VarioSkan Flash，美国 Thermo Scientific）测定封装在脂质体中的 Dox 浓度。

西安齐岳生物提供相关产品：

ICG-PEG-DOPE

CGKRK-PEG-DSPE

C18-PEGn-SH (SH: Thiol)

DMPE-PEG-NH2

BR2-PEG-DSPE

DPPE-PEG-N3

DSPE-PEG-Cy7

DSPE-PEG-CREKA（二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-*靶向蛋白)

DSPE-PEG-Heparin

DSG-PEG

以上文章内容来源各类期刊或文献，如有侵权请联系我们删除！