AF568-TSA，即 Alexa Fluor 568 Tyramide，是一种以Alexa Fluor 568荧光染料为核心的酪胺（tyramide）衍生物，属于信号放大技术（Tyramide Signal Amplification, TSA）体系的重要试剂之一。它结合了高亮度荧光染料和高反应活性的酪胺结构，广泛用于免疫检测、原位杂交（ISH）、免疫组织化学（IHC）、免疫细胞化学（ICC）以及多重荧光染色等生物学研究与诊断领域。

从分子结构上来看，AF568-Tyramide 是由 Alexa Fluor 568 荧光团通过碳链或短连接臂与酪胺（tyramine 或类似结构）偶联而成。Alexa Fluor 568 是一种基于罗丹明（rhodamine）类结构的荧光染料，发射波长在 603 nm 左右，激发波长约为 578 nm，呈现明亮的橙红色荧光，具有高的量子产率与光稳定性。相比传统罗丹明、Texas Red 等染料，Alexa Fluor 568 对光漂白的耐受性显著提高，尤其适用于荧光成像、共聚焦显微镜等需要长时间曝光或高功率激发的实验条件。

AF568-TSA 的核心技术依赖于 Tyramide信号放大机制（TSA）。在此系统中，首先利用辣根过氧化物酶（HRP, horseradish peroxidase）与靶标（如抗体或探针）的结合，将HRP定位于目标区域。随后加入含有 AF568-Tyramide 和微量过氧化氢的工作液，HRP 会催化过氧化氢分解产生高活性的酪胺自由基。这些自由基易与周围蛋白质中的酪氨酸残基发生共价结合，从而使 Alexa Fluor 568 分子牢固地“沉积”在靶标附近，大大增强荧光信号。这种放大效果能将检测灵敏度提升至常规免疫检测的10倍甚至上百倍，尤其适用于低丰度靶标的检测。

与其他荧光染料相比，Alexa Fluor 568 具有多项优异特性：

高亮度与高量子产率：发射光强强烈，即使在微弱信号下也易于检测。

光稳定性：在高强度光照下不易漂白，适合长时间观察。

pH稳定性：荧光在较宽的 pH 范围内保持稳定。

良好的水溶性：减少非特异性结合与背景噪音。

与常见激光线兼容：可被 561 nm 或 568 nm 激光有效激发，适用于多色荧光实验。

在实际应用中，AF568-TSA 主要用于以下场合：

免疫组织化学（IHC）：用于组织切片染色，检测特定蛋白或抗原。

原位杂交（ISH）：检测组织或细胞中的 RNA、DNA 序列，尤其是在病毒检测、癌症标志物分析中有广泛应用。

免疫细胞化学（ICC）：用于细胞培养物中靶标分子的定位与定量。

多重染色实验：由于其发射波长与其他染料（如 AF488, AF647）区分度高，可用于多重标记分析。

相关推荐：

CAS：1847485-97-5，ATP-Red 1

TechnoDye 502/512

3,5-Dimethyl-BDP ，3,5-Dimethyl BDP

ROX NH2, 6-isomer，ROX amine, 6-isomer

BDP FL L-Cystine

2500973-94-2，AF 488 hydrazide

AF568 DBCO，Alexa Fluor568 DBCO

Pyrene hydrazide 芘酰肼

2183440-65-3，FAM hydrazide, 6-isomer