文献:Surface Modification of Erythrocytes with Lipid Anchors: Structure–Activity Relationship for Optimal Membrane Incorporation, in vivo Retention, and Immunocompatibility
作者:Hanmant Gaikwad, Guankui Wang, Yue Li, David Bourne, Dmitri Simberg
文献链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/tra.12163
制备了Cy3:Cy3-C18、Cy3-C18:1、Cy3-C16、Cy3-14、Cy3-C12的二酰基甘油衍生物、磷脂衍生物Cy3-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(Cy3-DSPE)和Cy3-胆固醇。该库涵盖了不同的脂质长度、脂质类型以及头尾连接。
此外,该库还包括与药物输送相关的有限数量的头组衍生物。因此,聚乙二醇化脂质对红细胞聚乙二醇化血液伪装具有重要意义。Mtz是一个点击化学小组,可以对生物分子进行多种修饰,但也可以模拟小分子有效载荷(M w 230 Da).为了确定标记效率,我们使用了来自两名健康供体的新鲜人类红细胞。
红细胞在25℃时与脂质一起孵育 μM代表1 h,洗涤并用流式细胞术分析标记细胞的百分比和平均荧光强度(MFI)。短链DiI-C12和Cy3-二酰基甘油(C12,C14)和长链DiI-PEG5000、DiI-PEG3400Mtz、DiI-C18:2和Cy3-DSPE导致标记的人红细胞百分比最高(图2A)。DiI-C12、DiI-C16、DiI-C18、Cy3-DSPE和DiI-C18-PEG3400Mtz的MFI比其他脂质高2-3倍。
氨基DiI-C18的标记效率比母体DiI-C18低约4倍。然后使用选定的脂质标记小鼠红细胞。图2C、D中的数据显示,小鼠红细胞标记效率(MFI和红细胞百分比)通常高于人类红细胞。
除DiI-C12外,小鼠和人类红细胞标记效率之间没有相关性,DiI-C12在两种类型的红细胞中表现出最高的效率(图2E)。最后,我们检查了Cy3组信号在RBC中的线性。DiI-PEG3400Mtz显示,随着标记浓度的增加,小鼠红细胞MFI呈线性增加。
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