文献：Tumour targeted contrast enhanced ultrasound imaging dual-modal microbubbles for diagnosis and treatment of triple negative breast cancer

作者：Min Bai† a, Yang Dong†b, Hui Huangb, Hao Fub, Yourong DuanORCID logob, Qi WangORCID logo*c and Lianfang Du*a

文献链接：https://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2017/sc/c8ra09737b

DPPE-PEG-RGD的合成与表征

首先，将RGD（6.62 mmol）、EDC（7.28 mmol）和NHS（7.94 mmol）溶解在10 mL DMSO溶液中。在25°C下搅拌混合物1小时后，将DPPE-PEG-NH2（5.94 mmol）加入溶液中。

各组分的摩尔比为RGD[薄空间（1/6-em）]:[薄空间。将混合溶液在室温下搅拌反应8小时。其次，使用透析袋（Mw:2000）用1000mL蒸馏水透析溶液，以去除剩余的RGD肽（Mw:754）。真空干燥后，获得黄色粉末状DPPE-PEG-RGD，并储存在-20°C下。

通过核磁共振（NMR）光谱证实了DPPE-PEG-RGD的化学结构。

PTX负载RGD脂质微泡的制备(PTX@RGD-MBs)

起初PTX@RGD-MBs使用薄膜水合法制备。将2 mg DPPE-PEG-RGD、250μg胆固醇、500μg DPPC和0.1 mg PTX溶解在2 mL三氯甲烷溶液（PTX 0.05 mg mL−1）中，通过旋转蒸发形成混合膜。然后，加入5 mL PBS溶液，在37°C下使薄膜水合30分钟。接下来，溶液通过超声波处理器（JY92-2D超声波细胞破碎机，宁波斯琴茨生物技术有限公司）进行60秒（2-2s 400 W）的超声波分散。然后将脂质颗粒溶液冷冻干燥并置于20mL真空安培瓶中。将10mL SF6和5mL生理盐水注入安培瓶中，然后剧烈摇晃瓶子，直到冻干粉末完全分散，得到PTX@RGD-MBs溶液（PTX的浓度为0.02 mg mL−1）。为了满足不同实验的要求，在制备过程中PTX@RGD-MBs，用50μg Rb（罗丹明B，红色荧光探针）代替PTX制备Rb@RGD-MBs（Rb的浓度为10μg mL-1）。

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