HMRhoNox-M 是一种专门设计用于检测一氧化氮（NO）的荧光探针分子，其名称源于其结构特征中的荧光母体 rhodol（羟基甲基罗丹明）和 N-oxide（N-氧化物）识别单元。HMRhoNox-M 具有高灵敏度、高选择性和低背景信号的特点，能够在生物体内环境中实现对 NO 的可视化和定量检测。

分子结构与识别机制

HMRhoNox-M 由三个主要部分构成：

荧光母体（Rhodol 核）
Rhodol 是罗丹明类荧光染料的衍生物，结合了罗丹明和荧光素的结构特征，具有良好的荧光性质，包括高量子产率和水溶性。HMRhoNox-M 在未响应 NO 的状态下通常是荧光“关闭”状态，避免背景干扰。

N-氧化吡啶类识别单元（N-oxide）
这是对 NO 有特异识别作用的结构。当一氧化氮存在时，它可以与 N-oxide 结构发生选择性还原反应，触发分子结构重排，使荧光团恢复共轭结构，从而开启荧光发射。

连接键桥和修饰基团
用于优化细胞通透性、水溶性及反应动力学，有助于在复杂生物环境中提升探针的表现。

性能特点

高选择性
HMRhoNox-M 对 NO 有很高的选择性，对其他活性氧（ROS）或活性氮种（RNS），如 H₂O₂、O₂⁻、ONOO⁻、NO₂⁻ 等干扰小，避免误检。

荧光“关闭-开启”机制
在未与 NO 反应时，探针处于荧光关闭状态（暗态），反应后迅速开启（亮态），显著提高信噪比。

快速响应与细胞通透性
探针能够在细胞水平上迅速响应 NO，具有较强的膜通透性，可应用于活细胞和组织的成像。

发射波长位于可见光区域（绿色至橙红区）
HMRhoNox-M 发射光通常在 550–580 nm 左右，适合与标准荧光显微镜滤光片兼容，也方便与其他荧光标记共染。

实验使用方法

溶解方式：HMRhoNox-M 常以 DMSO 为溶剂配制母液，一般浓度为 1–5 mM，使用前稀释至工作浓度（1–10 μM）。

孵育条件：常规使用浓度为 5 μM，在细胞培养液中 37℃ 孵育 30–60 分钟。

检测方式：激发波长 ~500–520 nm，发射波长 ~550–580 nm，适合荧光显微镜、共聚焦显微镜或流式细胞仪分析。

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