Fluo-4 AM 是当前细胞钙成像领域中常用、性能优异的荧光探针之一,被誉为的“钙指示剂”。它是荧光素(fluorescein)类小分子探针的代表,专门用于检测细胞内游离钙离子(Ca²⁺)的浓度变化,广泛应用于基础研究、药物筛选、高通量检测以及细胞功能分析等多个领域。
英文名 Fluo-4 AM
CAS号 273221-67-3
分子量 1096.94000
密度 1.47
沸点 N/A
分子式 C51H50F2N2O23
熔点 N/A
化学结构与性质
Fluo-4 属于荧光素衍生物,其发射光谱与常用的 FITC 滤光片组完全兼容,激发波长约为 494 nm,发射波长在 516 nm 左右,发出明亮的绿色荧光。Fluo-4 AM 是 Fluo-4 的乙酸酯化形式(Acetoxymethyl ester),在分子两端引入了疏水性的 AM 基团,使其具有较好的细胞膜通透性。
一旦 Fluo-4 AM 穿过细胞膜进入胞内,就会在细胞内酯酶的作用下迅速水解去除 AM 基团,转化为亲水性的 Fluo-4 离子型形式,牢固滞留于胞内,进而用作 Ca²⁺ 检测探针。
性能特点
高灵敏度检测钙离子
Fluo-4 的 Ca²⁺ 解离常数(Kd)大约为 345 nM,特别适合检测细胞内从静息水平(约 100 nM)到数微摩尔范围的 Ca²⁺ 浓度变化,灵敏度足以捕捉短暂而快速的钙瞬变。
荧光增强显著
Fluo-4 在未与 Ca²⁺ 结合时荧光非常弱,一旦与 Ca²⁺ 结合,荧光强度可增强上百倍,产生强烈信号,便于微弱信号的检测。
与激光设备兼容性强
Fluo-4 与 488 nm 激光高度匹配,适合激光共聚焦显微镜、流式细胞仪以及高通量筛选设备。
细胞加载方便
Fluo-4 AM 的疏水性使其轻易进入细胞,染色条件简单,无需特别的转染步骤。
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